1) Estudiar el papel de las serín/treonín proteín fosfatasas en la inducción de genes pro-inflamatorios en el páncreas en la pancreatitis aguda, 2) Investigar el papel de las serín/treonín fosfatasas en el mecanismo de acción de la pentoxifilina como agente inflamatorio en la PA.
DiseñoModelo de PA necrótica en ratas inducida por taurocolato sódico al 3,5%. Determinación en páncreas de ratas de la fosforilación de ERK y MEK1/2 (western blotting), las actividades de las serín/treonín fosfatasas PP2A, PP2B y PP2C, la inducción de genes pro-inflamatorios (RT-PCR e immunoprecipitación de la cromatina) y el reclutamiento de factores de transcripción e histonas acetiltransferasas/deacetilasas (immunoprecipitación de la cromatina). Estudios en células acinares AR42J.
ResultadosLas actividades de las serín/treonín proteín fosfatasas PP2A, PP2B y PP2C en la PA (1h post-inducción) disminuyeron en un 50%, 57% y 29%, respectivamente, respecto a los controles. La pérdida de la actividad PP2A está mediada por una disminución en los niveles de AMPc. La pentoxifilina actúa inhibiendo la actividad fosfodiesterasa, impidiendo la pérdida de la actividad PP2A inducida por el taurocolato in vivo e in vitro, sin afectar a las demás ser/thr fosfatasas. La pentoxifilina previene la inducción de genes de respuesta temprana (egr-1, atf-3) y tardía (inos, icam, il-6, tnf-alpha), y el reclutamiento de las histonas acetiltransferasas a sus promotores génicos, así como el reclutamiento de factores de transcripción (NF-kB y C/BPbeta) en en el curso de la pancreatitis.
ConclusionesLa pérdida de actividad proteín fosfatasa PP2A puede ser un elemento clave en el inicio de la cascada inflamatoria en la pancreatitis aguda. El efecto beneficioso de la pentoxifilina y presumiblemente de otros inhibidores de fosfodiesterasas en esta enfermedad estaría mediada por la prevención de la pérdida de los niveles de AMPc y de la actividad PP2A en etapas muy tempranas de la pancreatitis aguda.
