Introducción: El carcinoma papilar de tiroides (PTC) se trata con cirugía, y Yoduro radioactivo (RAI). El yoduro entra en el epitelio folicular a través del transportador basal NIS (SLC5A5). La resistencia a RAI es debida bien a depleción, bien a deslocalización de NIS. Varios ensayos clínicos intentan la recuperación de la respuesta a RAI, genéricamente llamado rediferenciación. La microscopía 3D conserva la estructura morfológica del tejido, inalterada por manipulación al seccionar. La clarificación de los órganos hasta completa transparencia es fundamental para el paso de los láseres a través del órgano sin distorsiones. Sin embargo, presenta grandes dificultades en la tiroides debido a su gran vascularización y la organización del epitelio en folículos que contienen coloide, una densa matriz extracelular con tiroglobulina. Muchos epítopos de anticuerpos validados para parafina, no se conservan en microscopia 3D.

Objetivos: Estudiar PTC y neoplasia folicular nodular (TFND) mediante microscopía 3D, estandarizando marcadores claves: citoqueratina total (CK), CD31, citoqueratina 19 (CK19) y NIS.

Métodos: Las muestras se obtienen de la colección TIROCHUS, de excedentes de cirugía. Primero se estandarizó el protocolo general en tiroides de ratón. Después se adaptó cada etapa a la muestra más densa y compleja de tiroides humano. El proceso completo estandarizado precisa de 45 días. Se validaron tres anticuerpos REA Affinity (Miltenyi) y un anticuerpo para NIS. El procesó culmina en tecnología Lightsheet (Miltenyi), seguido de Imaris, y Confocal (Leica).

Resultados: La CK es homogénea en tiroides. CK19 se concentra en el área de invasión del PTC, y es negativa en TFND. Por el contrario, NIS es abundante en TFND y presenta marcaje reducido en PTC, con una distribución irregular.

Conclusiones: La microscopia 3D de tejido tiroideo puede contribuir a la investigación en los ensayos de rediferenciación.

Financiado por Agencia Estatal de Investigación AEI-PID2022-140149OB-I00.