Análisis de la composición de ácido araquidónico y ácidos grasos omega-3 en plasma, membrana eritrocitaria y células inmunitarias de pacientes con cirrosis

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Se representan los box-plot de la composición porcentual (%) de AA en controles y cirróticos clasificados según la escala Child. Los valores de significación (P) corresponden a las comparaciones bivariadas tras el ANOVA." ] ] ] "textoCompleto" => "IntroducciónEl hígado es el órgano fundamental en la regulación del metabolismo lipídico y en la síntesis de ácidos grasos poliinsaturados (PUFA). El ácido araquidónico (AA, C20:4 n-6) es un PUFA de la serie omega-6 que se sintetiza en el organismo a partir del ácido linoleico (AL, C18:2 n-6). El AA participa como metabolito esencial precursor de la síntesis de eicosanoides<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0005">1</a>. Su principal reservorio funcional es la membrana celular donde se incorpora a triglicéridos, ésteres de colesterol y mayoritariamente a glicerofosfolípidos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0010">2,3</a>. En respuesta a diferentes estímulos, el AA es liberado al citosol por la fosfolipasa A2<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0020">4</a> y rápidamente metabolizado por ciclooxigenasas (COX-1 y COX-2) y lipooxigenasas (5-LOX, 12-LOX, 15-LOX)<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0025">5,6</a> produciendo múltiples eicosanoides como prostaglandinas, prostaciclinas, tromboxanos, y leucotrienos que participan en la respuesta inflamatoria, la agregación plaquetaria y la regulación del tono vasoconstrictor en función del tejido y tipo celular<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035">7,8</a>.Los principales PUFA de la serie omega-3 son el ácido eicosapentaenoico (EPA, C20:5 n-3) y el ácido docosahexanoico (DHA, C22:6 n-3). Se sintetizan de forma limitada en el organismo a partir del α-linolénico (ALA, C18:3 n-3). Al igual que el AA pueden ser almacenados en los glicerofosfolípidos de las membranas celulares y su importancia radica en que pueden competir con el AA por enzimas metabólicos comunes modulando la producción de eicosanoides<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045">9</a>.El deterioro en la función hepática producida en la cirrosis se ha relacionado con cambios en el perfil de ácidos grasos en plasma y en membrana del eritrocito<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0050">10,11</a>, con aumentos en la composición de ácidos grasos saturados y descensos en monoinsaturados, y principalmente, con descensos en el contenido de AA<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060">12</a>.En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">figura 1</a> se representan los posibles efectos mediados por el AA, y modulados por los PUFA n-3, en hígado, riñón, plaquetas y células del sistema inmunológico. La biodisponibilidad de AA en estos tejidos se asocia con el aumento del tono vasoconstrictor en hígado y riñón, así como con la disfunción inmunitaria y los defectos en la coagulación observados en la cirrosis. Existen muchos estudios que relacionan la producción de eicosanoides con patologías presentes en la cirrosis. Algunos autores han relacionado la cirrosis con un estado hipercatabólico que aumenta la síntesis hepática de eicosanoides proinflamatorios y vasoconstrictores<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065">13</a>. Otros, relacionan déficits de AA con descensos en la producción renal de prostaglandinas vasodilatadoras en el síndrome hepatorrenal<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070">14</a>.<elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia>Por otra parte, están en revisión las alteraciones en la hemostasia primaria, agregación plaquetaria y la coagulación de los pacientes cirróticos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0075">15,16</a>. En las plaquetas, el AA es precursor de eicosanoides proagregantes, como el tromboxano A2 que es sintetizado por acción de la COX-1, y de isoprostanos que son generados por oxidación no enzimática del AA por especies reactivas de oxígeno (ROS) liberadas por la actividad NADPH-oxidasa plaquetaria.Así mismo, la cirrosis también se asocia con un fracaso en la capacidad fagocitaria del sistema inmunitario y retículo-endotelial hepático. Los cirróticos presentan mayor riesgo a padecer infecciones bacterianas. En células del sistema inmunitario a partir del AA se produce leucotrieno B4 (LTB4), un potente quimioatrayente, inductor de adhesión celular y de la liberación de enzimas hidrolíticos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085">17</a> y que es esencial para la activación de NADPH-oxidasa citosólica del neutrófilo y la liberación de ROS<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090">18</a>. Resulta plausible que anomalías en ácidos grasos puedan influir en la disfunción de las células inmunitarias observada en pacientes cirróticos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0095">19–21</a>. El sistema retículo-endotelial está encargado en último término del aclaramiento de bacterias y antígenos como el lipopolisacárido bacteriano (LPS) mediante los macrófagos residentes o las células Kuppfer. Estas células cuando entran en contacto con el LPS producen cisteinil leucotrienos (CysLT) que contribuyen al tono vasoconstrictor en el hígado cirrótico, como lo demuestra recientemente, que el tratamiento con Montelukast®, antagonista de los receptores de CysLT, reduce la hipertensión portal en modelos animales<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110">22</a>. Otras sustancias como el LTB4 y diversas prostaciclinas (PGE2, PGD2, PGF2, PGI2) relacionadas con la liberación de TNF-α, óxido nítrico y ROS en el hígado<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065">13</a> también son liberadas por los macrófagos en contacto con el LPS bacteriano. Aunque la célula de mayor trascendencia funcional sea el macrófago hepático, la evidente dificultad para su estudio en humanos, ha fomentado el estudio de células mononucleadas (PMBC) como modelo para examinar la función del macrófago en la cirrosis.ObjetivoEl objetivo de este trabajo fue estudiar la composición de AA, DHA y EPA en células mononucleadas «Peripheral Mononuclear Blood Cells» (monocitos y linfocitos, PMBC) y Células Polimorfonucleadas «Polymorphonuclear Blood Cells» (granulocitos, PMN) de sangre periférica en pacientes con cirrosis. La composición de las células, se correlacionó con la obtenida en el plasma, reflejo del metabolismo hepático, y en la membrana eritrocitaria, marcador del estado global de ácidos grasos en el organismo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115">23</a>. Posteriormente, se relacionó la composición de estos ácidos grasos con el grado de deterioro de la función hepática de los pacientes con cirrosis.Material y métodosRealizado en la Sección de Cromatografía del Servicio de Bioquímica Clínica del Hospital Ramón y Cajal durante un periodo de 2 años y con la colaboración del Servicio de Gastroenterología, se seleccionaron un total de 42 pacientes con cirrosis descompensada de diferentes etiologías (alcohólica, virus hepatitis B y C) y diferentes grados de deterioro de la función hepática clasificados según la escala Child-Pugh. Se incluyeron 4 pacientes Child A, 19 pacientes Child B y 19 pacientes Child C. Todos los pacientes con cirrosis mostraban un buen estado nutricional y presentaban un índice de masa corporal (IMC) superior a 18,5 kg/m2. Además, se seleccionaron 10 controles sanos.Se obtuvieron para controles y pacientes 4 tipos de muestras: plasma, membranas eritrocitarias, PMBC y células PMN.Obtención de plasma y membranas eritrocitarias: se partió de 3-5mL de sangre anticoagulada con EDTA-K3 que se centrifugó a 3.000rpm durante 15min y se separó la fase superior correspondiente al plasma. Las membranas eritrocitarias se obtuvieron tras un lavado con PBS y posterior lisado por choque osmótico con agua destilada fría. El lisado se centrifugó a 20.000g durante 20min obteniéndose el pellet correspondiente a las membranas de eritrocitos que se disolvió en PBS y se almacenó a -80°C para su posterior procesamiento.Aislamiento de células mononucleares (PMBC) y polimorfonuleares (PMN): el aislamiento se realizó utilizando el método descrito por Boyum et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120">24</a>. El método se basa en la diferente flotabilidad de cada tipo celular en un gradiente de desidad como se indica en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">figura 2</a>. La sangre anticoagulada con heparina (8mL) se diluyó con PBS y se depositó sobre el mismo volumen de Lymphoprep (densidad 1,077g/mL, Axis-Shield). Tras centrifugación a 1.900rpm durante 40min, los PMBC se aislaron de la interfase. Para el aislamiento de los PMN se descartó el plasma y el Lymphoprep. Se procedió a eliminar los eritrocitos contaminantes mediante sedimentación con dextrano al 6% y con solución de lisis. Aislados ambos tipos celulares, se resuspendieron en PBS y se comprobó su viabilidad, integridad y efectividad de la separación mediante un hemocitómetro como se muestra en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">figura 3</a>. Posteriormente se lisaron las células en KOH al 10% y se almacenaron a -80°C hasta su procesamiento.<elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia>Extracción de lípidos: para proceder al análisis de ácidos grasos en las muestras de células inmunitarias (PMBC y PMN) previamente se realizó una extracción de lípidos según el método de Folch<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0125">25</a>. La extracción se realizó utilizando 2mL de clorormo/metanol (2:1) y 500μL de muestra para mantener una proporción 1:4 y se mantuvo durante 2 horas en cámara fría. En las muestras de plasma y membrana eritrocitaria no fue necesario realizar extracción lipídica.Análisis de AA, EPA y DHA por cromatografía de gases y detección por espectroscopía de masas: el análisis de ácidos grasos se realizó basándonos en el método descrito por Lepage y Roy<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0130">26</a>. Se partió de 100μL de muestra (plasma, extracto de membrana eritrocitaria, o extractos lipídicos de las células inmunitarias), a los que se añadieron 50μL de patrón interno (C17:0 y C23:0, 40μg/mL cada uno). Seguidamente se transesterifican con cloruro de acetilo en metanol (1,75mL de metanol y 100μL de cloruro de acetilo por muestra) durante 18 horas a 50°C. Los metilésteres de los ácidos grasos (FAME) obtenidos se analizaron por cromatografía de gases con detección por espectrometría de masas. La columna empleada fue una HP-INNOWAX® (30m, 0,25μM, 0,1mm). La temperatura del inyector se fijó a 250°C y las muestras se inyectaron en modo splitless. Se inyectó 1μL de muestra en los PMN y PMBC y 0,2μL de muestra para el plasma. El horno del cromatógrafo de gases operó a una temperatura inicial de 50°C hasta 200°C a 25°C/min, seguidamente se incrementó la temperatura hasta 230°C a 1,5°C/min y se mantuvo durante 8min. El tiempo total de cada inyección fue de 35min. El espectrómetro de masas operó en modo SIM (selective ion monitoring), con un dwell time de 25 msec. Se seleccionó un ión cuantificador y 3 iones cualificadores (cuant, q1, q2, q3) para C17:0, C23:0 y C20:0 (74, 55, 87, 143), para AA y EPA (79, 180, 150, 108) y para DHA (79, 166, 150, 108). La estabilidad del tiempo de retención se fijó utilizando bloqueo del tiempo de retención (RTL) respecto al pico del ácido araquídico (C20:0).La concentración de AA, EPA y DHA se obtuvo tras integración de las señales correspondientes a los iones cuantificadores para estas sustancias e interpolación del valor de las áreas sobre las curvas de calibración a 6 niveles (100μg, 50μg, 25μg, 12,5μg, 6,25μg y 3.125μg) construidas a partir de un patrón de concentración conocida (GLC-462, NuCheck-INC) empleando el método del patrón interno. La composición porcentual de AA, EPA y DHA en cada muestra se realizó dividiendo la concentración de cada ácido graso por la concentración de ácidos grasos totales en cada muestra.ResultadosEn la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020">figura 4</a> se muestra un cromatograma como inyección representativa con la composición total de ácidos grasos en membrana eritrocitaria de uno de los pacientes estudiados. Se indican mediante flechas los picos correspondientes a AA, EPA y DHA. Cromatogramas similares se obtuvieron para plasma, PMBC y PMN.<elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia>Los resultados de nuestro estudio ponen de manifiesto la presencia de anomalías en la composición de ácidos grasos en el plasma y en la membrana eritrocitaria de pacientes con cirrosis descompensada. La <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a> muestra los resultados de composición porcentual obtenidos de AA, DHA y EPA en las muestras de plasma, membrana eritrocitaria y células inmunitarias (PMBC y PMN) en controles y en pacientes cirróticos clasificados según Child-Pugh. Los resultados se expresan como la media±la desviación estándar y entre paréntesis se indica el número de muestras analizadas en cada caso. También se muestra el grado de significación obtenido tras el análisis ANOVA. Se marcan en negrita los resultados estadísticamente significativos. Como puede observarse en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>, en cirróticos se evidencia un descenso significativo en la composición porcentual de AA, DHA y EPA en plasma. Así mismo, se aprecia un descenso significativo de AA en membrana eritrocitaria y además se observaron diferencias significativas en la composición de AA y DHA en las PMBC. Sin embargo, para los granulocitos (PMN) no observamos cambios significativos en la composición porcentual de estos ácidos grasos.<elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia>Los resultados correspondientes al AA en plasma, membrana eritrocitaria y PMBC se representan en las gráficas blox-pot en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0025">figura 5</a>. Se muestran los valores de significación (p) correspondientes a las comparaciones bivariadas tras el ANOVA. Si comparamos los resultados en controles con cirróticos Child C, se obtuvo una p=0,001 en plasma, p=0,04 en membrana de eritrocito y una p= 0,01 en PMBC. Se puede observar, por tanto, como el descenso de AA va siendo más acusado en aquellos pacientes con mayor deterioro de la función hepática.<elsevierMultimedia ident="fig0025"></elsevierMultimedia>DiscusiónLos resultados obtenidos en nuestro estudio ponen de manifiesto descensos en la composición de ácidos grasos (AA, DHA y EPA) en el plasma y además de AA en la membrana eritrocitaria de pacientes con cirrosis descompensada. Estos datos corroboran los resultados obtenidos por Cabré et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060">12</a>. Son varias las razones que han sido argumentadas en los últimos años para explicar este descenso. Por un lado, los cirróticos especialmente aquellos de etiología alcohólica, suelen presentar deficiencias nutricionales<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055">11</a>. En un estudio en pacientes con hepatopatía crónica se observaron carencias en la dieta que reducían la disponibilidad de ácidos grasos esenciales precursores como AL<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085">17</a>. En otros estudios, el descenso de ácidos grasos se relacionaría con problemas de malabsorción de grasas asociados al descenso en la producción de ácidos biliares<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0135">27-29</a> o también al déficit en las actividades enzimáticas (elongasa y desaturasa) necesarias para la conversión de AL en AA que en animales cirróticos han resultado deficitarias<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0150">30</a>. Además, el intento de normalizar el balance de ácidos grasos en enfermos con cirrosis avanzada mediante administración intravenosa de preparados ricos en precursores como AL y ALA no ha obtenido resultados satisfactorios<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0155">31</a>.En nuestro estudio, el déficit de AA y ácidos grasos obtenido, no parece deberse a la existencia de un aporte nutricional deficitario ya que se incluyeron pacientes con buen estado nutricional (IMC>18,5 kg/m2) y con cirrosis de diferentes etiologías (tanto etílica como por virus hepatitis B y C) por lo que podemos deducir que la deficiencia nutricional no parece ser la causa del déficit sino que se encuentra asociada a la funcionalidad hepática de estos enfermos. De hecho, nuestros resultados demuestran que el déficit de AA en plasma y en membrana eritrocitaria correlaciona con el deterioro de la función hepática y que esta deficiencia es más acusada en enfermos con mayor deterioro de la misma. En un estudio anterior, en una serie de 101 pacientes cirróticos se demostró que concentraciones de AA disminuidas relacionaba con la supervivencia de los enfermos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060">12</a>.Los resultados obtenidos en las células inmunitarias muestran una disminución significativa en la composición de AA en las PMBC de los pacientes cirróticos. Puesto que no es descartable que la presencia de un déficit de AA en estas células afecte a la producción de LTB4, la capacidad fagocitaria de las mismas pudiera verse afectada. De hecho, hay estudios que han demostrado que los monocitos de pacientes cirróticos presentan una capacidad fagocitaria disminuida<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0160">32</a>. Otros estudios, asocian una capacidad de producción de ROS en neutrófilos alterada en los cirróticos, reduciendo su capacidad de respuesta frente a bacterias<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0165">33</a>. En nuestro estudio no hemos encontrado diferencias significativas en la composición de ácidos grasos en los granulocitos (PMN) estudiados.Otro resultado a considerar es la alteración en la composición de DHA en las PMBC en los pacientes cirróticos. Se observa una tendencia a que los cirróticos presenten una mayor composición de DHA que los controles pero no sabemos cuál es la causa, aunque parece que pueda influir en la respuesta inmunitaria.Los omega-3 están encargados de aumentar la producción de mediadores antiinflamatorios (protectinas y resolvinas) que reducen el estrés oxidativo y el daño necroinflamatorio en el hígado<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0170">34</a>. La suplementación de ácidos grasos en la cirrosis ha renovado su interés<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0175">35</a> y podría ser de relevancia, por tanto, valorar el efecto que sobre los pacientes cirróticos y sobre las células del sistema inmunitario pudieran ejercer futuras intervenciones en el aporte de ácidos grasos omega-3 en pacientes con hepatopatía crónica.Las conclusiones más relevantes de nuestro estudio son:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0005"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0005">1)Los cirróticos presentan un descenso significativo en los porcentajes de AA, EPA y DHA en plasma y un descenso significativo de AA en membrana eritrocitaria.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0010">2)El contenido de AA en plasma y en membrana eritrocitaria correlaciona con el deterioro en la función hepática (según Child-Pugh) y no depende de un deficitario aporte nutricional.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0015">3)La composición en AA y DHA está alterada en los PBMC de cirróticos, lo que pudiera tener importancia en la funcionalidad de las células inmunitarias de estos enfermos.</li></ul>Conflicto de interesesLos autores declaran no tener ningún conflicto de intereses." "textoCompletoSecciones" => array:1 [ "secciones" => array:11 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "xres114635" "titulo" => array:4 [ 0 => "Resumen" 1 => "Introducción y objetivo" 2 => "Pacientes y métodos" 3 => "Resultados y conclusiones" ] ] 1 => array:2 [ "identificador" => "xpalclavsec101950" "titulo" => "Palabras clave" ] 2 => array:2 [ "identificador" => "xres114634" "titulo" => array:4 [ 0 => "Abstract" 1 => "Introduction and objetive" 2 => "Patients and methods" 3 => "Results and conclusions" ] ] 3 => array:2 [ "identificador" => "xpalclavsec101949" "titulo" => "Keywords" ] 4 => array:2 [ "identificador" => "sec0005" "titulo" => "Introducción" ] 5 => array:2 [ "identificador" => "sec0010" "titulo" => "Objetivo" ] 6 => array:2 [ "identificador" => "sec0015" "titulo" => "Material y métodos" ] 7 => array:2 [ "identificador" => "sec0020" "titulo" => "Resultados" ] 8 => array:2 [ "identificador" => "sec0025" "titulo" => "Discusión" ] 9 => array:2 [ "identificador" => "sec0030" "titulo" => "Conflicto de intereses" ] 10 => array:1 [ "titulo" => "Bibliografía" ] ] ] "pdfFichero" => "main.pdf" "tienePdf" => true "fechaRecibido" => "2012-02-29" "fechaAceptado" => "2012-05-28" "PalabrasClave" => array:2 [ "es" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Palabras clave" "identificador" => "xpalclavsec101950" "palabras" => array:4 [ 0 => "Ácido araquidónico" 1 => "Ácidos grasos" 2 => "Cirrosis" 3 => "Cromatografía de gases" ] ] ] "en" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Keywords" "identificador" => "xpalclavsec101949" "palabras" => array:4 [ 0 => "Arachidonic acid" 1 => "Fatty acids" 2 => "Cirrhosis" 3 => "Gas chromatography" ] ] ] ] "tieneResumen" => true "resumen" => array:2 [ "es" => array:2 [ "titulo" => "Resumen" "resumen" => "Introducción y objetivoLa participación de mediadores lipídicos derivados del ácido araquidónico (AA) en la lesión hepatocelular de la cirrosis y su modulación por ácidos grasos omega-3 como los ácidos docosahexaenoico (DHA) y eicosapentaenoico (EPA) es un tema de interés creciente. El contenido de AA, EPA y DHA puede ser importante para explicar, entre otras funciones, el tono vasoconstrictor del hígado y la capacidad funcional (fagocitosis, producción de ROS) de las células inmunitarias observada en la cirrosis. El objetivo del trabajo fue estudiar las alteraciones en la composición de AA, DHA y EPA en plasma, membrana eritrocitaria y células inmunitarias de sangre periférica en pacientes con cirrosis y establecer su relación con el deterioro de la función hepática. Pacientes y métodosSe analizó la composición de ácidos grasos de 42 pacientes con cirrosis clasificados según Child-Pugh y 10 controles sanos en plasma, membrana eritrocitaria y células mononucleares (PMBC) y polimorfonucleares (PMN) de sangre periférica por cromatografía de gases con detección por masas. Resultados y conclusiones1) Los cirróticos presentan un descenso significativo en los porcentajes de AA, EPA y DHA en plasma y un descenso significativo de AA en membrana eritrocitaria. 2) El contenido de AA en plasma y en membrana eritrocitaria correlaciona con el deterioro en la función hepática (según Child-Pugh) y no depende de un deficitario aporte nutricional. 3) La composición en AA y DHA está alterada en los PBMC de cirróticos, lo que pudiera tener importancia en la funcionalidad de las células inmunitarias de estos enfermos." ] "en" => array:2 [ "titulo" => "Abstract" "resumen" => "Introduction and objetiveThe involvement of lipid mediators derived from arachidonic acid (AA) in cirrhosis hepatocellular injury and its modulation by omega-3 fatty acids, such as docosahexaenoic acid (DHA) and eicosapentaenoic (EPA) is a topic of growing interest. The content of AA, EPA and DHA may be important to explain, among other things, the vasoconstrictor tone of liver and functional capacity (phagocytosis, ROS production) of immune cells observed in cirrhosis. The objective was to study alterations in the composition of AA, DHA and EPA in plasma, erythrocyte membranes and peripheral blood immune cells in patients with cirrhosis and determine their relationship with liver function impairment. Patients and methodsWe analyzed the fatty acid composition of 42 patients with cirrhosis using the Child-Pugh classification, and 10 healthy controls in plasma, erythrocyte membrane and mononuclear cells (PBMCs) and polymorphonuclear (PMN) from peripheral blood using gas chromatography with mass detection. Results and conclusions1) Patients with cirrhosis showed significant decreases in the percentages of AA in plasma and erythrocyte membrane, as well as EPA and DHA in plasma. 2) AA content in plasma and erythrocyte membrane correlates with impaired liver function (Child scale) and it does not depend on a nutritional deficit. 3) AA and DHA composition varies also in PBMC (lymphocytes and monocytes) of cirrhosis, which may affect immune function of these cells." ] ] "NotaPie" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "☆" "nota" => "Este trabajo corresponde a una comunicación científica presentada y premiada con accésit en el V Congreso Nacional del Laboratorio Clínico celebrado en Málaga del 9 al 11 de noviembre de 2011." ] ] "multimedia" => array:6 [ 0 => array:7 [ "identificador" => "fig0005" "etiqueta" => "Figura 1" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr1.jpeg" "Alto" => 1770 "Ancho" => 2306 "Tamanyo" => 223615 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Efectos mediados por el AA en células y tejidos en la cirrosis. El AA es metabolizado por la vía de la COX y LOX en diferentes eicosanoides dependiendo del tejido: CysLT (LTC4, LTD4), prostaciclinas (PGI2), prostaglandinas (PGE2), tromboxanos (TXA2) y leucotrienos (LTB4). La biodisponibilidad de AA en estos tejidos se asocia con el aumento del tono vasoconstrictor en hígado y riñón, así como a la disfunción inmunitaria y a los defectos en la coagulación observados en la cirrosis. Los ácidos grasos omega-3 (EPA y DHA) y sus metabolitos contrarrestan la acción del AA." ] ] 1 => array:7 [ "identificador" => "fig0010" "etiqueta" => "Figura 2" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr2.jpeg" "Alto" => 1735 "Ancho" => 1582 "Tamanyo" => 91658 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Poblaciones celulares en función de su densidad. Las células mononucleares (monocitos y linfocitos, PMBC) tienen menor densidad que las polimorfonucleares (granulocitos, PMN) y los eritrocitos." ] ] 2 => array:7 [ "identificador" => "fig0015" "etiqueta" => "Figura 3" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr3.jpeg" "Alto" => 1634 "Ancho" => 2500 "Tamanyo" => 231382 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Aislamiento de PMBC mediante gradiente de Lymphoprep. Se deposita la sangre diluida sobre el Lymphoprep y se centrifuga. Los linfocitos y monocitos (PMBC) se aislan en la interfase entre plasma y Lymphoprep. La fase inferior contiene los granulocitos (PMN) y eritrocitos. A la derecha se muestran las gráficas de citometría procedentes del aislamiento de PMBC y PMN." ] ] 3 => array:7 [ "identificador" => "fig0020" "etiqueta" => "Figura 4" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr4.jpeg" "Alto" => 1203 "Ancho" => 1583 "Tamanyo" => 88736 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Cromatograma de ácidos grasos de membrana eritrocitaria. Se muestra una inyección representativa con la composición total de ácidos grasos en la membrana eritrocitaria de uno de los pacientes estudiados. Se indica con flechas los picos correspondientes a AA, EPA y DHA. Cromatogramas similares se obtuvieron en las muestras de plasma, PMBC y PMN." ] ] 4 => array:7 [ "identificador" => "fig0025" "etiqueta" => "Figura 5" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr5.jpeg" "Alto" => 3035 "Ancho" => 2865 "Tamanyo" => 261711 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Composición porcentual de AA, en plasma, membrana eritrocitaria y células mononucleadas (PMBC). Se representan los box-plot de la composición porcentual (%) de AA en controles y cirróticos clasificados según la escala Child. Los valores de significación (P) corresponden a las comparaciones bivariadas tras el ANOVA." ] ] 5 => array:7 [ "identificador" => "tbl0005" "etiqueta" => "Tabla 1" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "tabla" => array:2 [ "leyenda" => "AA: ácido araquidónico; DHA: ácido docosahexaenoico; EPA: ácido eicosapentaenoico; NS: no significativo." 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\t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Child C \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Anova \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " colspan="6" align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">AA</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Plasma (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">8,52±1,6 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">7,21±3,13 (4) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">5,23±1,62 (17) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">4,72±1,4 (19) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,000 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Eritrocito (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">18,31±2,79 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">15,14±1,31 (4) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">15,05±3,09 (19) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">14,58±2,93 (15) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,023 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">PMN (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">6,53±1,39 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">4,2±3,27 (2) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">5,51±2,25 (14) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">4,82±1,62 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,059 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">PMBC (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">10,34±2,92 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">4,77±(2) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">11,35±3,67 (14) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">7,2±3,62 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,026 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " colspan="6" align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " colspan="6" align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">EPA</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Plasma (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,53±0,69 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,31±0,13 (4) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,31±0,29 (17) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,28±0,3 (19) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,042 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Eritrocito (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,31±0,13 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,34±0,16 (4) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,32±0,14 (19) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,33±0,13 (15) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">NS \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">PMN (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,07±0,1 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,08±0,05 (2) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,09±0,05 (14) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,08±0,03 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">NS \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">PMBC (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,13±0,2 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,07±(2) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,13±0,09 (14) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,08±0,04 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">NS \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " colspan="6" align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " colspan="6" align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">DHA</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Plasma (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">2,02±0,71 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1,45±0,73 (4) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1,52±0,55 (17) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1,29±0,48 (19) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,022 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Eritrocito (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">5,39±0,88 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">5,29±1,15 (4) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">4,92±1 (19) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">5,23±0,94 (15) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">NS \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">PMN (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,53±0,14 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,94±0,58 (2) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1,36±1,02 (14) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,96±0,31 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">NS \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">PMBC (%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,96±0,29 (9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1,01±(2) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1,98±0,86 (14) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1,4±0,72 (10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,015 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></tbody></table> """ ] "imagenFichero" => array:1 [ 0 => "xTab202656.png" ] ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Composición porcentual de AA, EPA Y DHA en controles y pacientes cirróticos. 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Estadísticas

Original

Analysis of composition of arachidonic acid and fatty acids omega-3 in plasma, erythrocyte membrane and immune cells in patients with cirrhosis

Laura Chamorro Lópeza, Javier Martínez Gonzálezb, Ana María García Canoa, Rebeca Busto Duránc,e, Agustín Albillos Martínezb,d,e, Óscar Pastor Rojoa,e,

Autor para correspondencia

opastor@ono.com

Autor para correspondencia.

a Servicio de Bioquímica Clínica, Hospital Universitario Ramón y Cajal, Madrid, España

b Servicio de Gastroenterología, Hospital Universitario Ramón y Cajal, Madrid, España

c Servicio de Bioquímica-Investigación, Hospital Universitario Ramón y Cajal, Madrid, España

d Departamento de Medicina, Universidad de Alcalá de Henares, Madrid, España

e Instituto Ramón y Cajal de Investigación Sanitaria (IRyCIS), Madrid, España

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En respuesta a diferentes est&#237;mulos&#44; el AA es liberado al citosol por la fosfolipasa A<span class="elsevierStyleInf">2</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0020"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a> y r&#225;pidamente metabolizado por ciclooxigenasas &#40;COX-1 y COX-2&#41; y lipooxigenasas &#40;5-LOX&#44; 12-LOX&#44; 15-LOX&#41;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0025"><span class="elsevierStyleSup">5&#44;6</span></a> produciendo m&#250;ltiples eicosanoides como prostaglandinas&#44; prostaciclinas&#44; tromboxanos&#44; y leucotrienos que participan en la respuesta inflamatoria&#44; la agregaci&#243;n plaquetaria y la regulaci&#243;n del tono vasoconstrictor en funci&#243;n del tejido y tipo celular<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span></a>&#46;</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los principales PUFA de la serie omega-3 son el &#225;cido eicosapentaenoico &#40;EPA&#44; C20&#58;5 n-3&#41; y el &#225;cido docosahexanoico &#40;DHA&#44; C22&#58;6 n-3&#41;&#46; Se sintetizan de forma limitada en el organismo a partir del &#945;-linol&#233;nico &#40;ALA&#44; C18&#58;3 n-3&#41;&#46; Al igual que el AA pueden ser almacenados en los glicerofosfol&#237;pidos de las membranas celulares y su importancia radica en que pueden competir con el AA por enzimas metab&#243;licos comunes modulando la producci&#243;n de eicosanoides<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El deterioro en la funci&#243;n hep&#225;tica producida en la cirrosis se ha relacionado con cambios en el perfil de &#225;cidos grasos en plasma y en membrana del eritrocito<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10&#44;11</span></a>&#44; con aumentos en la composici&#243;n de &#225;cidos grasos saturados y descensos en monoinsaturados&#44; y principalmente&#44; con descensos en el contenido de AA<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a>&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">figura 1</a> se representan los posibles efectos mediados por el AA&#44; y modulados por los PUFA n-3&#44; en h&#237;gado&#44; ri&#241;&#243;n&#44; plaquetas y c&#233;lulas del sistema inmunol&#243;gico&#46; La biodisponibilidad de AA en estos tejidos se asocia con el aumento del tono vasoconstrictor en h&#237;gado y ri&#241;&#243;n&#44; as&#237; como con la disfunci&#243;n inmunitaria y los defectos en la coagulaci&#243;n observados en la cirrosis&#46; Existen muchos estudios que relacionan la producci&#243;n de eicosanoides con patolog&#237;as presentes en la cirrosis&#46; Algunos autores han relacionado la cirrosis con un estado hipercatab&#243;lico que aumenta la s&#237;ntesis hep&#225;tica de eicosanoides proinflamatorios y vasoconstrictores<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a>&#46; Otros&#44; relacionan d&#233;ficits de AA con descensos en la producci&#243;n renal de prostaglandinas vasodilatadoras en el s&#237;ndrome hepatorrenal<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">14</span></a>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por otra parte&#44; est&#225;n en revisi&#243;n las alteraciones en la hemostasia primaria&#44; agregaci&#243;n plaquetaria y la coagulaci&#243;n de los pacientes cirr&#243;ticos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">15&#44;16</span></a>&#46; En las plaquetas&#44; el AA es precursor de eicosanoides proagregantes&#44; como el tromboxano A<span class="elsevierStyleInf">2</span> que es sintetizado por acci&#243;n de la COX-1&#44; y de isoprostanos que son generados por oxidaci&#243;n no enzim&#225;tica del AA por especies reactivas de ox&#237;geno &#40;ROS&#41; liberadas por la actividad NADPH-oxidasa plaquetaria&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">As&#237; mismo&#44; la cirrosis tambi&#233;n se asocia con un fracaso en la capacidad fagocitaria del sistema inmunitario y ret&#237;culo-endotelial hep&#225;tico&#46; Los cirr&#243;ticos presentan mayor riesgo a padecer infecciones bacterianas&#46; En c&#233;lulas del sistema inmunitario a partir del AA se produce leucotrieno B4 &#40;LTB<span class="elsevierStyleInf">4</span>&#41;&#44; un potente quimioatrayente&#44; inductor de adhesi&#243;n celular y de la liberaci&#243;n de enzimas hidrol&#237;ticos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17</span></a> y que es esencial para la activaci&#243;n de NADPH-oxidasa citos&#243;lica del neutr&#243;filo y la liberaci&#243;n de ROS<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">18</span></a>&#46; Resulta plausible que anomal&#237;as en &#225;cidos grasos puedan influir en la disfunci&#243;n de las c&#233;lulas inmunitarias observada en pacientes cirr&#243;ticos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">19&#8211;21</span></a>&#46; El sistema ret&#237;culo-endotelial est&#225; encargado en &#250;ltimo t&#233;rmino del aclaramiento de bacterias y ant&#237;genos como el lipopolisac&#225;rido bacteriano &#40;LPS&#41; mediante los macr&#243;fagos residentes o las c&#233;lulas Kuppfer&#46; Estas c&#233;lulas cuando entran en contacto con el LPS producen cisteinil leucotrienos &#40;CysLT&#41; que contribuyen al tono vasoconstrictor en el h&#237;gado cirr&#243;tico&#44; como lo demuestra recientemente&#44; que el tratamiento con Montelukast<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#44; antagonista de los receptores de CysLT&#44; reduce la hipertensi&#243;n portal en modelos animales<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">22</span></a>&#46; Otras sustancias como el LTB<span class="elsevierStyleInf">4</span> y diversas prostaciclinas &#40;PGE<span class="elsevierStyleInf">2</span>&#44; PGD<span class="elsevierStyleInf">2</span>&#44; PGF<span class="elsevierStyleInf">2</span>&#44; PGI<span class="elsevierStyleInf">2</span>&#41; relacionadas con la liberaci&#243;n de TNF-&#945;&#44; &#243;xido n&#237;trico y ROS en el h&#237;gado<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a> tambi&#233;n son liberadas por los macr&#243;fagos en contacto con el LPS bacteriano&#46; Aunque la c&#233;lula de mayor trascendencia funcional sea el macr&#243;fago hep&#225;tico&#44; la evidente dificultad para su estudio en humanos&#44; ha fomentado el estudio de c&#233;lulas mononucleadas &#40;PMBC&#41; como modelo para examinar la funci&#243;n del macr&#243;fago en la cirrosis&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Objetivo</span><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El objetivo de este trabajo fue estudiar la composici&#243;n de AA&#44; DHA y EPA en c&#233;lulas mononucleadas &#171;Peripheral Mononuclear Blood Cells&#187; &#40;monocitos y linfocitos&#44; PMBC&#41; y C&#233;lulas Polimorfonucleadas &#171;Polymorphonuclear Blood Cells&#187; &#40;granulocitos&#44; PMN&#41; de sangre perif&#233;rica en pacientes con cirrosis&#46; La composici&#243;n de las c&#233;lulas&#44; se correlacion&#243; con la obtenida en el plasma&#44; reflejo del metabolismo hep&#225;tico&#44; y en la membrana eritrocitaria&#44; marcador del estado global de &#225;cidos grasos en el organismo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">23</span></a>&#46; Posteriormente&#44; se relacion&#243; la composici&#243;n de estos &#225;cidos grasos con el grado de deterioro de la funci&#243;n hep&#225;tica de los pacientes con cirrosis&#46;</p></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Material y m&#233;todos</span><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Realizado en la Secci&#243;n de Cromatograf&#237;a del Servicio de Bioqu&#237;mica Cl&#237;nica del Hospital Ram&#243;n y Cajal durante un periodo de 2 a&#241;os y con la colaboraci&#243;n del Servicio de Gastroenterolog&#237;a&#44; se seleccionaron un total de 42 pacientes con cirrosis descompensada de diferentes etiolog&#237;as &#40;alcoh&#243;lica&#44; virus hepatitis B y C&#41; y diferentes grados de deterioro de la funci&#243;n hep&#225;tica clasificados seg&#250;n la escala Child-Pugh&#46; Se incluyeron 4 pacientes Child A&#44; 19 pacientes Child B y 19 pacientes Child C&#46; Todos los pacientes con cirrosis mostraban un buen estado nutricional y presentaban un &#237;ndice de masa corporal &#40;IMC&#41; superior a 18&#44;5 kg&#47;m<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#46; Adem&#225;s&#44; se seleccionaron 10 controles sanos&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se obtuvieron para controles y pacientes 4 tipos de muestras&#58; plasma&#44; membranas eritrocitarias&#44; PMBC y c&#233;lulas PMN&#46;</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Obtenci&#243;n de plasma y membranas eritrocitarias</span>&#58; se parti&#243; de 3-5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mL de sangre anticoagulada con EDTA-K<span class="elsevierStyleInf">3</span> que se centrifug&#243; a 3&#46;000<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>rpm durante 15<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>min y se separ&#243; la fase superior correspondiente al plasma&#46; Las membranas eritrocitarias se obtuvieron tras un lavado con PBS y posterior lisado por choque osm&#243;tico con agua destilada fr&#237;a&#46; El lisado se centrifug&#243; a 20&#46;000<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>g durante 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>min obteni&#233;ndose el pellet correspondiente a las membranas de eritrocitos que se disolvi&#243; en PBS y se almacen&#243; a -80<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C para su posterior procesamiento&#46;</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Aislamiento de c&#233;lulas mononucleares &#40;PMBC&#41; y polimorfonuleares &#40;PMN&#41;&#58;</span> el aislamiento se realiz&#243; utilizando el m&#233;todo descrito por Boyum et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">24</span></a>&#46; El m&#233;todo se basa en la diferente flotabilidad de cada tipo celular en un gradiente de desidad como se indica en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">figura 2</a>&#46; La sangre anticoagulada con heparina &#40;8<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mL&#41; se diluy&#243; con PBS y se deposit&#243; sobre el mismo volumen de Lymphoprep &#40;densidad 1&#44;077<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>g&#47;mL&#44; Axis-Shield&#41;&#46; Tras centrifugaci&#243;n a 1&#46;900<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>rpm durante 40<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>min&#44; los PMBC se aislaron de la interfase&#46; Para el aislamiento de los PMN se descart&#243; el plasma y el Lymphoprep&#46; Se procedi&#243; a eliminar los eritrocitos contaminantes mediante sedimentaci&#243;n con dextrano al 6&#37; y con soluci&#243;n de lisis&#46; Aislados ambos tipos celulares&#44; se resuspendieron en PBS y se comprob&#243; su viabilidad&#44; integridad y efectividad de la separaci&#243;n mediante un hemocit&#243;metro como se muestra en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">figura 3</a>&#46; Posteriormente se lisaron las c&#233;lulas en KOH al 10&#37; y se almacenaron a -80<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C hasta su procesamiento&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Extracci&#243;n de l&#237;pidos&#58;</span> para proceder al an&#225;lisis de &#225;cidos grasos en las muestras de c&#233;lulas inmunitarias &#40;PMBC y PMN&#41; previamente se realiz&#243; una extracci&#243;n de l&#237;pidos seg&#250;n el m&#233;todo de Folch<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">25</span></a>&#46; La extracci&#243;n se realiz&#243; utilizando 2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mL de clorormo&#47;metanol &#40;2&#58;1&#41; y 500<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;L de muestra para mantener una proporci&#243;n 1&#58;4 y se mantuvo durante 2 horas en c&#225;mara fr&#237;a&#46; En las muestras de plasma y membrana eritrocitaria no fue necesario realizar extracci&#243;n lip&#237;dica&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">An&#225;lisis de AA&#44; EPA y DHA por cromatograf&#237;a de gases y detecci&#243;n por espectroscop&#237;a de masas&#58;</span> el an&#225;lisis de &#225;cidos grasos se realiz&#243; bas&#225;ndonos en el m&#233;todo descrito por Lepage y Roy<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0130"><span class="elsevierStyleSup">26</span></a>&#46; Se parti&#243; de 100<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;L de muestra &#40;plasma&#44; extracto de membrana eritrocitaria&#44; o extractos lip&#237;dicos de las c&#233;lulas inmunitarias&#41;&#44; a los que se a&#241;adieron 50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;L de patr&#243;n interno &#40;C17&#58;0 y C23&#58;0&#44; 40<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#47;mL cada uno&#41;&#46; Seguidamente se transesterifican con cloruro de acetilo en metanol &#40;1&#44;75<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mL de metanol y 100<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;L de cloruro de acetilo por muestra&#41; durante 18 horas a 50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#46; Los metil&#233;steres de los &#225;cidos grasos &#40;FAME&#41; obtenidos se analizaron por cromatograf&#237;a de gases con detecci&#243;n por espectrometr&#237;a de masas&#46; La columna empleada fue una HP-INNOWAX<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> &#40;30<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>m&#44; 0&#44;25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;M&#44; 0&#44;1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm&#41;&#46; La temperatura del inyector se fij&#243; a 250<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C y las muestras se inyectaron en modo splitless&#46; Se inyect&#243; 1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;L de muestra en los PMN y PMBC y 0&#44;2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;L de muestra para el plasma&#46; El horno del cromat&#243;grafo de gases oper&#243; a una temperatura inicial de 50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C hasta 200<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C a 25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#47;min&#44; seguidamente se increment&#243; la temperatura hasta 230<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C a 1&#44;5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#47;min y se mantuvo durante 8<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>min&#46; El tiempo total de cada inyecci&#243;n fue de 35<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>min&#46; El espectr&#243;metro de masas oper&#243; en modo SIM &#40;<span class="elsevierStyleItalic">selective ion monitoring</span>&#41;&#44; con un dwell time de 25 msec&#46; Se seleccion&#243; un i&#243;n cuantificador y 3 iones cualificadores &#40;<span class="elsevierStyleItalic">cuant</span>&#44; q1&#44; q2&#44; q3&#41; para C17&#58;0&#44; C23&#58;0 y C20&#58;0 &#40;<span class="elsevierStyleItalic">74</span>&#44; 55&#44; 87&#44; 143&#41;&#44; para AA y EPA &#40;<span class="elsevierStyleItalic">79</span>&#44; 180&#44; 150&#44; 108&#41; y para DHA &#40;<span class="elsevierStyleItalic">79</span>&#44; 166&#44; 150&#44; 108&#41;&#46; La estabilidad del tiempo de retenci&#243;n se fij&#243; utilizando bloqueo del tiempo de retenci&#243;n &#40;RTL&#41; respecto al pico del &#225;cido araqu&#237;dico &#40;C20&#58;0&#41;&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La concentraci&#243;n de AA&#44; EPA y DHA se obtuvo tras integraci&#243;n de las se&#241;ales correspondientes a los iones cuantificadores para estas sustancias e interpolaci&#243;n del valor de las &#225;reas sobre las curvas de calibraci&#243;n a 6 niveles &#40;100<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#44; 50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#44; 25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#44; 12&#44;5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#44; 6&#44;25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g y 3&#46;125<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#41; construidas a partir de un patr&#243;n de concentraci&#243;n conocida &#40;GLC-462&#44; NuCheck-INC&#41; empleando el m&#233;todo del patr&#243;n interno&#46; La composici&#243;n porcentual de AA&#44; EPA y DHA en cada muestra se realiz&#243; dividiendo la concentraci&#243;n de cada &#225;cido graso por la concentraci&#243;n de &#225;cidos grasos totales en cada muestra&#46;</p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Resultados</span><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020">figura 4</a> se muestra un cromatograma como inyecci&#243;n representativa con la composici&#243;n total de &#225;cidos grasos en membrana eritrocitaria de uno de los pacientes estudiados&#46; Se indican mediante flechas los picos correspondientes a AA&#44; EPA y DHA&#46; Cromatogramas similares se obtuvieron para plasma&#44; PMBC y PMN&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados de nuestro estudio ponen de manifiesto la presencia de anomal&#237;as en la composici&#243;n de &#225;cidos grasos en el plasma y en la membrana eritrocitaria de pacientes con cirrosis descompensada&#46; La <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a> muestra los resultados de composici&#243;n porcentual obtenidos de AA&#44; DHA y EPA en las muestras de plasma&#44; membrana eritrocitaria y c&#233;lulas inmunitarias &#40;PMBC y PMN&#41; en controles y en pacientes cirr&#243;ticos clasificados seg&#250;n Child-Pugh&#46; Los resultados se expresan como la media<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>la desviaci&#243;n est&#225;ndar y entre par&#233;ntesis se indica el n&#250;mero de muestras analizadas en cada caso&#46; Tambi&#233;n se muestra el grado de significaci&#243;n obtenido tras el an&#225;lisis ANOVA&#46; Se marcan en negrita los resultados estad&#237;sticamente significativos&#46; Como puede observarse en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>&#44; en cirr&#243;ticos se evidencia un descenso significativo en la composici&#243;n porcentual de AA&#44; DHA y EPA en plasma&#46; As&#237; mismo&#44; se aprecia un descenso significativo de AA en membrana eritrocitaria y adem&#225;s se observaron diferencias significativas en la composici&#243;n de AA y DHA en las PMBC&#46; Sin embargo&#44; para los granulocitos &#40;PMN&#41; no observamos cambios significativos en la composici&#243;n porcentual de estos &#225;cidos grasos&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados correspondientes al AA en plasma&#44; membrana eritrocitaria y PMBC se representan en las gr&#225;ficas blox-pot en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0025">figura 5</a>&#46; Se muestran los valores de significaci&#243;n &#40;p&#41; correspondientes a las comparaciones bivariadas tras el ANOVA&#46; Si comparamos los resultados en controles con cirr&#243;ticos Child C&#44; se obtuvo una p<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;001 en plasma&#44; p<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;04 en membrana de eritrocito y una p&#61; 0&#44;01 en PMBC&#46; Se puede observar&#44; por tanto&#44; como el descenso de AA va siendo m&#225;s acusado en aquellos pacientes con mayor deterioro de la funci&#243;n hep&#225;tica&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0025"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Discusi&#243;n</span><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados obtenidos en nuestro estudio ponen de manifiesto descensos en la composici&#243;n de &#225;cidos grasos &#40;AA&#44; DHA y EPA&#41; en el plasma y adem&#225;s de AA en la membrana eritrocitaria de pacientes con cirrosis descompensada&#46; Estos datos corroboran los resultados obtenidos por Cabr&#233; et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a>&#46; Son varias las razones que han sido argumentadas en los &#250;ltimos a&#241;os para explicar este descenso&#46; Por un lado&#44; los cirr&#243;ticos especialmente aquellos de etiolog&#237;a alcoh&#243;lica&#44; suelen presentar deficiencias nutricionales<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a>&#46; En un estudio en pacientes con hepatopat&#237;a cr&#243;nica se observaron carencias en la dieta que reduc&#237;an la disponibilidad de &#225;cidos grasos esenciales precursores como AL<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17</span></a>&#46; En otros estudios&#44; el descenso de &#225;cidos grasos se relacionar&#237;a con problemas de malabsorci&#243;n de grasas asociados al descenso en la producci&#243;n de &#225;cidos biliares<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0135"><span class="elsevierStyleSup">27-29</span></a> o tambi&#233;n al d&#233;ficit en las actividades enzim&#225;ticas &#40;elongasa y desaturasa&#41; necesarias para la conversi&#243;n de AL en AA que en animales cirr&#243;ticos han resultado deficitarias<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">30</span></a>&#46; Adem&#225;s&#44; el intento de normalizar el balance de &#225;cidos grasos en enfermos con cirrosis avanzada mediante administraci&#243;n intravenosa de preparados ricos en precursores como AL y ALA no ha obtenido resultados satisfactorios<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0155"><span class="elsevierStyleSup">31</span></a>&#46;</p><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En nuestro estudio&#44; el d&#233;ficit de AA y &#225;cidos grasos obtenido&#44; no parece deberse a la existencia de un aporte nutricional deficitario ya que se incluyeron pacientes con buen estado nutricional &#40;IMC<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#62;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>18&#44;5 kg&#47;m<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#41; y con cirrosis de diferentes etiolog&#237;as &#40;tanto et&#237;lica como por virus hepatitis B y C&#41; por lo que podemos deducir que la deficiencia nutricional no parece ser la causa del d&#233;ficit sino que se encuentra asociada a la funcionalidad hep&#225;tica de estos enfermos&#46; De hecho&#44; nuestros resultados demuestran que el d&#233;ficit de AA en plasma y en membrana eritrocitaria correlaciona con el deterioro de la funci&#243;n hep&#225;tica y que esta deficiencia es m&#225;s acusada en enfermos con mayor deterioro de la misma&#46; En un estudio anterior&#44; en una serie de 101 pacientes cirr&#243;ticos se demostr&#243; que concentraciones de AA disminuidas relacionaba con la supervivencia de los enfermos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a>&#46;</p><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados obtenidos en las c&#233;lulas inmunitarias muestran una disminuci&#243;n significativa en la composici&#243;n de AA en las PMBC de los pacientes cirr&#243;ticos&#46; Puesto que no es descartable que la presencia de un d&#233;ficit de AA en estas c&#233;lulas afecte a la producci&#243;n de LTB<span class="elsevierStyleInf">4</span>&#44; la capacidad fagocitaria de las mismas pudiera verse afectada&#46; De hecho&#44; hay estudios que han demostrado que los monocitos de pacientes cirr&#243;ticos presentan una capacidad fagocitaria disminuida<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0160"><span class="elsevierStyleSup">32</span></a>&#46; Otros estudios&#44; asocian una capacidad de producci&#243;n de ROS en neutr&#243;filos alterada en los cirr&#243;ticos&#44; reduciendo su capacidad de respuesta frente a bacterias<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0165"><span class="elsevierStyleSup">33</span></a>&#46; En nuestro estudio no hemos encontrado diferencias significativas en la composici&#243;n de &#225;cidos grasos en los granulocitos &#40;PMN&#41; estudiados&#46;</p><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Otro resultado a considerar es la alteraci&#243;n en la composici&#243;n de DHA en las PMBC en los pacientes cirr&#243;ticos&#46; Se observa una tendencia a que los cirr&#243;ticos presenten una mayor composici&#243;n de DHA que los controles pero no sabemos cu&#225;l es la causa&#44; aunque parece que pueda influir en la respuesta inmunitaria&#46;</p><p id="par0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los omega-3 est&#225;n encargados de aumentar la producci&#243;n de mediadores antiinflamatorios &#40;protectinas y resolvinas&#41; que reducen el estr&#233;s oxidativo y el da&#241;o necroinflamatorio en el h&#237;gado<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0170"><span class="elsevierStyleSup">34</span></a>&#46; La suplementaci&#243;n de &#225;cidos grasos en la cirrosis ha renovado su inter&#233;s<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0175"><span class="elsevierStyleSup">35</span></a> y podr&#237;a ser de relevancia&#44; por tanto&#44; valorar el efecto que sobre los pacientes cirr&#243;ticos y sobre las c&#233;lulas del sistema inmunitario pudieran ejercer futuras intervenciones en el aporte de &#225;cidos grasos omega-3 en pacientes con hepatopat&#237;a cr&#243;nica&#46;</p><p id="par0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las conclusiones m&#225;s relevantes de nuestro estudio son&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0005"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0005"><span class="elsevierStyleLabel">1&#41;</span><p id="par0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los cirr&#243;ticos presentan un descenso significativo en los porcentajes de AA&#44; EPA y DHA en plasma y un descenso significativo de AA en membrana eritrocitaria&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0010"><span class="elsevierStyleLabel">2&#41;</span><p id="par0125" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El contenido de AA en plasma y en membrana eritrocitaria correlaciona con el deterioro en la funci&#243;n hep&#225;tica &#40;seg&#250;n Child-Pugh&#41; y no depende de un deficitario aporte nutricional&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0015"><span class="elsevierStyleLabel">3&#41;</span><p id="par0130" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La composici&#243;n en AA y DHA est&#225; alterada en los PBMC de cirr&#243;ticos&#44; lo que pudiera tener importancia en la funcionalidad de las c&#233;lulas inmunitarias de estos enfermos&#46;</p></li></ul></p></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Conflicto de intereses</span><p id="par0135" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ning&#250;n conflicto de intereses&#46;</p></span></span>"
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          "es" => "<p id="spar0045" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Aislamiento de PMBC mediante gradiente de Lymphoprep&#46; Se deposita la sangre diluida sobre el Lymphoprep y se centrifuga&#46; Los linfocitos y monocitos &#40;PMBC&#41; se aislan en la interfase entre plasma y Lymphoprep&#46; La fase inferior contiene los granulocitos &#40;PMN&#41; y eritrocitos&#46; A la derecha se muestran las gr&#225;ficas de citometr&#237;a procedentes del aislamiento de PMBC y PMN&#46;</p>"
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          "es" => "<p id="spar0050" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Cromatograma de &#225;cidos grasos de membrana eritrocitaria&#46; Se muestra una inyecci&#243;n representativa con la composici&#243;n total de &#225;cidos grasos en la membrana eritrocitaria de uno de los pacientes estudiados&#46; Se indica con flechas los picos correspondientes a AA&#44; EPA y DHA&#46; Cromatogramas similares se obtuvieron en las muestras de plasma&#44; PMBC y PMN&#46;</p>"
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          "es" => "<p id="spar0055" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Composici&#243;n porcentual de AA&#44; en plasma&#44; membrana eritrocitaria y <span class="elsevierStyleItalic">c&#233;lulas mononucleadas &#40;PMBC&#41;</span>&#46; Se representan los box-plot de la composici&#243;n porcentual &#40;&#37;&#41; de AA en controles y cirr&#243;ticos clasificados seg&#250;n la escala Child&#46; Los valores de significaci&#243;n &#40;P&#41; corresponden a las comparaciones bivariadas tras el ANOVA&#46;</p>"
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Control&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Child A&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Child B&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Child C&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Anova&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">AA</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>Plasma &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">8&#44;52<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;6 &#40;10&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">7&#44;21<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>3&#44;13 &#40;4&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">5&#44;23<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;62 &#40;17&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">4&#44;72<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;4 &#40;19&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;000&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>Eritrocito &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">18&#44;31<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2&#44;79 &#40;9&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">15&#44;14<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;31 &#40;4&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">15&#44;05<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>3&#44;09 &#40;19&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">14&#44;58<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2&#44;93 &#40;15&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;023&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>PMN &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">6&#44;53<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;39 &#40;9&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4&#44;2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>3&#44;27 &#40;2&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#44;51<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2&#44;25 &#40;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4&#44;82<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;62 &#40;10&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;059&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>PMBC &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">10&#44;34<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2&#44;92 &#40;9&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">4&#44;77<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#40;2&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">11&#44;35<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>3&#44;67 &#40;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">7&#44;2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>3&#44;62 &#40;10&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;026&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " colspan="6" align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleVsp" style="height:0.5px"></span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " colspan="6" align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">EPA</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>Plasma &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;53<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;69 &#40;10&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;31<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;13 &#40;4&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;31<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;29 &#40;17&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;28<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;3 &#40;19&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;042&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>Eritrocito &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;31<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;13 &#40;9&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;34<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;16 &#40;4&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;32<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;14 &#40;19&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;33<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;13 &#40;15&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">NS&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>PMN &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;07<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;1 &#40;9&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;08<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05 &#40;2&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;09<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05 &#40;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;08<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;03 &#40;10&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">NS&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>PMBC &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;13<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;2 &#40;9&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;07<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#40;2&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;13<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;09 &#40;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;08<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;04 &#40;10&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">NS&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " colspan="6" align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleVsp" style="height:0.5px"></span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " colspan="6" align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">DHA</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>Plasma &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2&#44;02<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;71 &#40;10&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&#44;45<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;73 &#40;4&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&#44;52<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;55 &#40;17&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&#44;29<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;48 &#40;19&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;022&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>Eritrocito &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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Información del artículo

ISSN: 18884008
Idioma original: Español

DOI:10.1016/j.labcli.2012.05.004

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2024 Septiembre	206	8	214
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2014 Enero	49	0	49
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2013 Noviembre	77	0	77
2013 Octubre	47	1	48
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