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Vol. 43. Núm. 6.
Páginas 293-300 (Junio - Julio 2020)
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Vol. 43. Núm. 6.
Páginas 293-300 (Junio - Julio 2020)
Original article
DOI: 10.1016/j.gastrohep.2020.01.004
Mucosal expression of defensin-5, soluble phospholipase A2 and lysozyme in the intestine in a rat model of acute liver failure and its relationship to intestinal bacterial translocation
Expresión de defensina-5, fosfolipasa A2 soluble y lisozima en la mucosa intestinal en un modelo de rata con insuficiencia hepática aguda y su relación con la traslocación bacteriana intestinal
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Silin Chena,f, Xiaopeng Lia,b,f, Ming Lia,b, Qing Meic, Juanjun Huangd, Zhenping Wue, Lunli Zhanga,b,
Autor para correspondencia
lunliz@126.com

Corresponding author.
a Department of Infectious Diseases, First Affiliated Hospital of Nanchang University, Jiangxi, China
b Key Laboratory of Liver Regeneration Medicine, Jiangxi, China
c Department of Ultrasound, Jing Zhou Central Hospital, Hubei, China
d Department of Infectious Diseases, Ganzhou People's Hospital, Jiangxi, China
e Zhejiang University School of Medicine, First Affiliated Hospital, Zhejiang, China
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Table 1. Results of bacterial cultures of MLNs, liver and spleen.
Table 2. Serological markers of the control and the experimental groups at different time points (x¯±s).
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Abstract
Introduction

To study the expression of defensin-5 (RD-5), soluble phospholipase A2 (sPLA2) and lysozyme in the intestine in a rat model of acute liver failure and its relationship with intestinal bacterial translocation (BT).

Patients and methods

Sprague–Dawley (SD) rats were divided into two groups. The experimental group was divided into five subgroups according to the lapsing time after the model was established, which were designated accordingly as 8h, 16h, 24h, 48h, and 72h groups. Acute liver failure (ALF) model was induced by intraperitoneal injection of 10% d-galactosamine. The homogenates of mesenteric lymph nodes (MLNs), liver and spleen from each group were cultured in agar to determine the bacterial outgrowth. The mRNA expression of RD-5, sPLA2, lysozyme and the protein expression of sPLA2, lysozyme were determined.

Results

No bacteria grew in the organ cultures from the control group while experimental groups had positive cultures. Expression of the RD-5 and sPLA2 mRNA in the experimental groups gradually increased at early time points and peaked 16h after induction of ALF, then progressively decreased. The mRNA expression of lysozyme in the experimental group peaked at 8h after ALF induction, then progressively decreased. Similar results were obtained with Western blot and immunohistochemical staining.

Discussion

The immune barrier function of the ileal mucosa in the rat model of acute liver failure was compromised as demonstrated by the decreased expression of RD-5, sPLA2 and lysozyme in Paneth cells along with increased intestinal bacterial translocation.

Keywords:
Acute liver failure
Defensin-5
Phospholipase A2
Lysozyme
Bacterial translocation
Abbreviations:
RD-5
sPLA2
BT
AMPs
SD
ALF
H.E.
ALT
AST
TBil
DBil
Alb
Resumen
Introducción

Estudiar la expresión de defensina-5 (RD-5), fosfolipasa A2 soluble (sPLA2) y lisozima en el intestino de un modelo de rata con insuficiencia hepática aguda y su relación con la traslocación bacteriana (TB) intestinal.

Pacientes y métodos

Se dividieron ratas Sprague-Dawley® (SD) en 2 grupos. El grupo experimental se dividió en 5 subgrupos según el tiempo transcurrido desde que se estableció el modelo, y se designaron en consecuencia como grupos de 8, 16, 24, 48 y 72h. El modelo de insuficiencia hepática aguda (IHA) se indujo mediante inyección intraperitoneal de D-galactosamina al 10%. Se cultivaron homogeneizados de ganglios linfáticos mesentéricos (GLM), hígado y bazo de cada grupo en agar para determinar la proliferación bacteriana. Se determinaron la expresión de ARNm de RD-5, sPLA2 y lisozima, y la expresión de proteínas de sPLA2 y lisozima.

Resultados

En los cultivos de órganos del grupo de control no creció ninguna bacteria, mientras que los grupos experimentales presentaron cultivos positivos. La expresión del ARNm de RD-5 y sPLA2 en los grupos experimentales aumentó gradualmente en los primeros momentos y alcanzó el máximo 16h después de la inducción de la IHA, para después disminuir de forma progresiva. La expresión de lisozima en el grupo experimental alcanzó el valor máximo 8h después de la inducción de la IHA y después disminuyó progresivamente. Se obtuvieron resultados similares con la inmunoelectrotransferencia y la tinción inmunohistoquímica.

Discusión

La función de barrera inmunológica de la mucosa ileal en el modelo de rata de insuficiencia hepática aguda se vio afectada, como lo demuestra la disminución de la expresión de RD-5, sPLA2 y lisozima en las células de Paneth junto con el aumento de la translocación bacteriana intestinal.

Palabras clave:
Insuficiencia hepática aguda
Defensina-5
Fosfolipasa A2
Lisozima
Traslocación bacteriana

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