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Vol. 6. Núm. 3.
Páginas 180-185 (Julio 2008)
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Páginas 180-185 (Julio 2008)
Utilidad de la FISH en espermatozoidescomo análisis complementario de rutina en un laboratorio de andrología
Usefulness of FISH in sperm as a complementary routine analysis in the andrology laboratory
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Rocío Núñez Calongea, Susana Cortés Gallegoa, Marta Gago Garcíaa, Enrique Olaya Vilaa, Patricia López Domíngueza, Pedro Caballero Peregrína
a Unidad de Reproducci??n. Cl??nica Tambre. Madrid. Espa??a.
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Tablas (5)
TABLA 1. Número de casos y frecuencia de alteraciones cromosómicas en función de las indicaciones de la hibridación in situ por fluorescencia (FISH)
TABLA 2. Número de casos y frecuencia de alteraciones cromosómicas en función de las indicaciones de la hibridación in situ por fluorescencia (FISH): fallo de microinyección espermática (ICSI) o fallo de donación de ovocitos
TABLA 3. Número de casos y frecuencia de alteraciones cromosómicas en los casos diagnosticados previamente como fallo de implantación y aborto de repetición que presentan además factor masculino severo
TABLA 4. Evolución de los 42 casos con resultado de la hibridación in situ por fluorescencia (FISH) alterado
Figura 1. Tasa de fecundación, división y calidad embrionaria (embriones de grados 1 y 2) comparada en los grupos de varones con hibridación in situ por fluorescencia (FISH) normal frente a los que obtuvieron resultado anómalo para alguno de los cromosomas estudiados en los ciclos previos de microinyección espermática (ICSI). No se encontraron diferencias estadísticamente significativas.
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Introducción: El estudio de aneuploidías en los cromosomas de núcleos espermáticos previamente fijados y decondensados por técnicas de fluorescencia con hibridación in situ (FISH), ha demostrado ser de gran utilidad en el estudio del contenido cromosómico espermático. Por otra parte, los resultados derivados de los estudios realizados en individuos infértiles con cariotipo normal han puesto de manifiesto incrementos en la frecuencia de producción de espermatozoides aneuploides y diploides. En este trabajo se han analizado retrospectivamente nuestros resultados de FISH en espermatozoides en pacientes con cariotipo normal y riesgo de anomalías cromosómicas debido los siguientes factores: aborto de repetición, fallos repetidos de implantación después de ICSI y factor masculino severo. Los objetivos de este estudio son: a) analizar la relación entre cualquiera de estas indicaciones previas y un incremento de espermatozoides aneuploides o diploides; b) ya que algunas de las parejas incluidas en el estudio han realizado varios ciclos de microinyecciones espermáticas (ICSI), conocer el efecto de las anomalías cromosómicas en la tasa de fecundación, división, implantación y abortos, y c) conocer si la realización de FISH en espermatozoides para estas indicaciones puede emplearse como test de rutina en un laboratorio de andrología. Material y métodos: En el estudio se han incluido 158 varones con cariotipo normal, a los que se les ha realizado estudio de FISH en espermatozoides durante el año 2007 para estudio de aneuploidías y diploidías para los cromosomas 13, 14, 15, 18, 20, 21, 22, X e Y mediante sondas específicas. Las indicaciones para la realización de FISH fueron: 112 pacientes con fallos previos de fertilización in vitro (FIV), 26 con factor masculino y 20 con abortos de repetición. También se estudió, de forma retrospectiva, los resultados de los ciclos de ICSI antes de realizar el FISH: tasa de fecundación, división y calidad embrionaria. Resultados: El porcentaje de muestras de semen con incremento estadísticamente significativo de espermatozoides con aneuploidías ha sido del 26,5%. De éstos, el 21,4% eran fallos de FIV, 30,7% factor masculino y 50% abortos de repetición. En los casos diagnosticados como fallo de FIV con factor masculino se encontraron anomalías en un 35,7%. En los casos de aborto de repetición con factor masculino las anomalías se encontraron en un 66,6%. No hubo diferencias en las tasas de fecundación, división y calidad embrionaria en los ciclos previos de ICSI con semen normal o alterado. Conclusiones: El porcentaje de varones con anomalías cromosómicas encontrado, sobre todo si se suma el factor masculino con fallo de FIV, revelan la idoneidad de realizar esta técnica en los casos indicados.
Palabras clave:
Espermatozoide
Aneuploidías espermáticas
FISH
Infertilidad masculina
Introduction: Fluorescent in situ hybridization (FISH) in decondensed sperm nuclei has proven to be a good method for determining the chromosome content of spermatozoa. Even among infertile men with a normal karyotype, there is a considerable frequency of chromosomal abnormalities limited to the germ line. In the present study, we have retrospectively analysed our FISH results on spermatozoa in a series of patients with normal karyotypes who have a risk of sperm chromosomal abnormalities due to several factors such as, recurrent spontaneous miscarriages, repeated implantation failures after ICSI and male factor. The objectives of the study were: a) to investigate whether these indications were actually associated with an increased incidence of sperm aneuploidy and diploidy; b) to examine the correlation between sperm chromosomal abnormalities on ICSI outcome in terms of fertilization, cleavage and embryo quality; and c) to find out if sperm FISH analysis could be used as a routine test in the andrology laboratory. Material and methods: Sperm aneuploidy and diploidy rates for chromosomes 13, 14, 15, 18, 20, 21, 22, X and Y were evaluated in 158 patients with normal karyotypes using specific probes. Indications for sperm FISH analysis were: recurrent miscarriages of unknown aetiology (n = 20), repeated implantation failures after ICSI (n = 112) and male factor (n = 26). We also retrospectively analysed ICSI outcome (fertilization rate, cleavage and embryo quality) before FISH analysis. Results: The incidence of sperm samples with a significant increase in aneuploidy was 26.5%. Oligoasthenoteratozoospermia patients: 30.7%, implantation failures: 21.4% and recurrent miscarriages: 50%. There was a total of 35.7% of patients with male factor and implantation failure with abnormal FISH results and 66.6% with male factor and recurrent miscarriages. There were no significant differences in fertilisation rate, cleavage and embryo quality between groups. Conclusions: Our results confirm a potential role for aneuploidy testing in the work-up of patients as a predictor of success, as well as in future genetic counselling.
Keywords:
Spermatozoa
Sperm aneuploidy
FISH
Male infertility

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