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Inicio Revista Española de Medicina Nuclear e Imagen Molecular Método rápido de marcaje de leucocitos con 99mTc HM-PAO
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Vol. 21. Núm. 5.
Páginas 343-348 (septiembre 2002)
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Vol. 21. Núm. 5.
Páginas 343-348 (septiembre 2002)
Método rápido de marcaje de leucocitos con 99mTc HM-PAO
Fast method of labelling leukocytes with 99mTc HM PAO
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C. Pieraa, A. Vázqueza, M A. Hernándeza, M C. Planchaa, A. Ruiza, J J. Mateosa, F. Martína, M L. Ortegaa, S. Fuertesa, F. Ponsa
a Servei de Medicina Nuclear. Centre de Diagnòstic per la Imatge. IDIBAPS. Hospital Clínic. Barcelona.
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Tabla 1. RECUPERACION DE LEUCOCITOS EN FUNCION DE LAS g (N = 7)
Tabla 2. RECUPERACIÓN DE LEUCOCITOS Y CONTAMINACIÓN DE HEMATÍES Y PLAQUETAS EN EL PRL OBTENIDO POR SEDIMENTACIÓN (1xg) Y POR CENTRIFUGACIÓN (5xg)
Tabla 3. COMPARACIÓN DE LOS MARCAJES POR LOS MÉTODOS DE SEDIMENTACIÓN (MS) Y CENTRIFUGACIÓN (MC)
Fig. 1. --Rendimiento de marcaje en función del número de leucocitos. Método de sedimentación (MS).
Fig. 2. --Rendimiento de marcaje en función del número de leucocitos. Método de centrifugación (MC).
Tabla 4. RADIACTIVIDAD EN LOS ELEMENTOS CELULARES SANGUÍNEOS DETERMINADA MEDIANTE GRADIENTES DE DENSIDAD (N = 4)
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Objetivo: Modificar el método de marcaje de leucocitos con 99mTc HM-PAO centrifugando 15 minutos a bajas gravedades (g), en lugar de sedimentar a tiempo variable (30-90 minutos), para obtener el plasma rico en leucocitos (PRL). Métodos: Se determinó el número de g que recuperan el mayor número de leucocitos. Se analizó la composición celular de los PRL obtenidos por centrifugación y por sedimentación. Por último, se compararon los resultados del marcaje en dos grupos de pacientes (p): uno de 118 p utilizando el método tradicional de sedimentación (MS) y otro de 124 p utilizando la alternativa propuesta de la centrifugación (MC). Resultados: La centrifugación a 5xg proporcionó la mayor recuperación de leucocitos (93,1 ± 5,1%). No se observó diferencia significativa en la recuperación de leucocitos en los PRL obtenidos por centrifugación o por sedimentación. No obstante, la contaminación de eritrocítos fue superior por centrifugación (12,8 ± 4,9 x 108) que por sedimentación (7,7 ± 3,5 x 108) (p < 0,0001). La comparación entre el MS y el MC dio los siguientes resultados: El número de leucocitos recuperados por ambos métodos fue equivalente (73,9 ± 15,1% vs 76,5 ± 12,7%) con similar contaminación de plaquetas (8,0 ± 6,2% vs 8,4 ± 6,5%) El número de eritrocitos contaminantes por leucocito fue de 3,0 ± 1,0 por el MS y 5,1 ± 2,6 por el MC (p < 0,001). El rendimiento de marcaje (RM) fue algo superior por el MC (57,8 ± 11,9%) que por el MS (50,8 ± 12,6%) como consecuencia de la mayor contaminación de eritrocitos y de la superior PRQ del 99mTc HM-PAO utilizado en los marcajes por el MC (90,9 ± 5,9%) respecto al MS (87,9 ± 9,5%). No se observó diferencia en las imágenes gammagráficas obtenidas por uno u otro método, dada la escasa captación del radiofármaco por los eritrocitos (3-7%) en comparación con la captación leucocitaria (70-90%). Conclusión: El MC propuesto acorta considerablemente el tiempo de marcaje de leucocitos con 99mTc HM-PAO sin afectar a la calidad de las imágenes gammagráficas, lo que representa una importante alternativa de marcaje a introducir en las Unidades de Radiofarmacia de los Servicios de Medicina Nuclear.
Palabras clave:
Leucocitos 99mTc HM-PAO
Método rápido de marcaje
Objective: To modify the method of labelling leukocytes with 99mTc HM-PAO by centrifuging 15 minutes at low gravity (g) instead of sedimentation at a variable time (30-90 minutes) to obtain leukocytic rich plasma (LRP). Methods: The g number recovering the greatest number of leukocytes was determined. The cellular composition of LRP obtained by centrifugation and sedimentation was analyzed. Lastly, labelling results in two groups of patients (p) were compared: one group of 118 p using the traditional sedimentation method (SM) and another of 124 p using the proposed centrifugation alternative (CM). Results: Centrifugation at 5xg produced the greatest recovery of leukocytes (93.1 ± 5.1%). No significant difference was observed in leukocyte recovery in LRP obtained either by centrifugation or by sedimentation. However, red blood cell contamination was greater in centrifugation (12.8 ± 4.9 x 108) than in sedimentation (7.7 ± 3.5 x 108) (p < 0.0001). The comparison of the SM and the CM gave the following results: The number of leukocytes recovered in both methods was similar (73.9 ± 15.1% vs 76.5 ± 12.7%) with approximately the same platelet contamination (8.0 ± 6.2 vs 8.4 ± 6.5%). The number of red blood cell contaminants per leukocyte was 3.0 ± 1.0 for the MS and 5.1 ± 2.6 for the MC (p < 0.001). Labelling yield (LY) was somewhat higher for the CM (57.8 ± 11.9%) than for the SM (50.8 ± 12.6%) as a result of greater red blood cell contamination and superior radiochemical purity of the 99mTc HM-PAO used in the labelling by CM (90,9 ± 5,9%) with regard to the SM (87.9 ± 9.5%). No difference was observed in the scintigraphic images obtained with either of the methods, given the scarce uptake of the radiopharmaceutical by the red blood cells (3-7%) in comparison with the leukocyte uptake (70-90%). Conclusion: The proposed MC considerably reduces the labelling time of leukocytes with 99mTc HM-PAO without affecting the quality of scintigraphic images and represents an important labelling alternative of great interest to the Radiopharmacy Units of Nuclear Medicine Services.
Keywords:
Leukocytes 99mTc HM-PAO
Fast method of labelling

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