Evaluación de la electroforesis capilar como método de detección y medida de proteína de Bence Jones

Resumen

Introducción

Las proteínas de Bence Jones (PBJ) son cadenas ligeras libres monoclonales de inmunoglobulinas que aparecen en orina por producción excesiva de un clon de linfocitos B. Se han asociado a distintas enfermedades y tienen importante significado clínico. En este trabajo se ha evaluado la electroforesis capilar (EC) como método para su detección y medida.

Material y métodos

Se analizaron 74 muestras de orina de 24 h, para estudiar la PBJ mediante EC (previa desalinización de la muestra por ultrafiltración), inmunofijación y electroforesis de alta resolución en gel agarosa. Asimismo, se realizó un estudio de la imprecisión y del límite de detección de la EC.

Resultados

La sensibilidad de la EC fue del 97,8% y la especificidad del 75,9%, sin diferencias entre muestras con baja o alta concentración de proteínas totales en orina. La agarosa presentó una sensibilidad y especificidad globales del 64,4% y 96,6%, respectivamente, siendo estos valores más altos en las muestras con concentraciones de proteínas totales en orina superiores a 150 mg/L. La imprecisión de la EC para la medida de la PBJ osciló entre el 1,1% y el 4,5%. El límite de detección fue de 3 mg/L para PBJ de clase kappa y de 1 mg/L para PBJ de clase lambda.

Conclusiones

En la detección de la PBJ, la EC presentó valores altos de sensibilidad, especificidad y reproducibilidad, y un límite de detección muy bajo. La EC requiere un pretratamiento de las muestras, pero permite la detección y medida de las PBJ de manera automatizada y reproducible, con una sensibilidad cercana a la inmunofijación.

Summary

Introduction

Bence-Jones proteins (BJP) are monoclonal immunoglobulin free light chains that are detected in urine due to an over-production by a B-lymphocyte clone. BJP have been linked to various diseases, with significant clinical signance. In this work, capillary electrophoresis (CE) has been evaluated as a technique for the detection and quantification of BJP.

Material and methods

Twenty four-hour urine samples from 74 patients were analyzed for BJP by CE (with a previous ultrafiltration step), immunofixation, and high resolution electrophoresis on agarose gel. Imprecision and the detection limit of CE were also studied.

Results

Sensitivity and specificity of CE was 97.8% and 75.9%, respectively. No differences were found between samples with a high or low urinary total protein concentration. Sensitivity and specificity of agarose were 64.4% and 96.6%, respectively, but these values were higher in samples with a urinary total protein concentration above 150 mg/L. Imprecision of CE in the quantification of BJP was 1.1-4.5%. Detection limit for kappa and lambda BJP were 3 mg/L and 1 mg/L, respectively.

Conclusions

In the detection of BJP by CE, sensitivity, specificity and reproducibility were very high, whereas the detection limit was very low. CE requires the prior treatment of samples, but it provides an automated and reproducible method for detecting and measuring BJP, with a sensitivity very close to that of immunofixation.