Reacción en cadena de polimerasa para detectar Mycobacterium leprae en muestras de moco nasal de convivientes de pacientes con lepra

Resumen

Antecedentes

El descenso mundial de la prevalencia de la lepra no ha coincidido con un descenso de su incidencia, hecho que podría explicarse por la presencia de infecciones subclínicas bacilíferas en la comunidad.

Objetivo

El objetivo de este estudio consistió en detectar Mycobacterium leprae en muestras de moco nasal de contactos intradomiciliarios, sin signos ni síntomas, de pacientes con lepra empleando una prueba de reacción en cadena de la polimerasa anidada (n-PCR), con el fin de utilizar dicha técnica en la monitorización de poblaciones de alto riesgo.

Métodos

Se utilizó la técnica n-PCR utilizando un par de iniciadores LP1 y LP2 externos para amplificar un fragmento de 129 pares de bases (pb) del elemento RLEP3 región o secuencia X17153 de M. leprae y un segundo par de iniciadores LP3 y LP4 que hibridó dentro de la secuencia anterior para amplificar un producto final de 99 pares de bases. La prueba se aplicó a 26 contactos intradomiciliarios de pacientes procedentes de áreas con alta prevalencia de lepra.

Resultados

Se detectó la presencia del bacilo en muestras de moco nasal de 5 (19,23%) de 26 contactos intradomiciliarios sanos. Todos los contactos intradomiciliarios de casos que resultaron positivos (n=5) procedían de municipios con una prevalencia alta.

Conclusiones

La técnica n-PCR es una herramienta útil de detección y seguimiento precoz de posibles casos de lepra y se puede utilizar en la monitorización de poblaciones de alto riesgo. La técnica de PCR puede usarse en la detección subclinica de la infección por M. leprae.

Abstrat

Background

While the prevalence of leprosy has declined around the world, there has not been a corresponding decrease in its incidence, which could be explained by the presence of subclinical bacilliferous infections in the community.

Objective

The objective of this study was to investigate the use of a nested-polymerase chain reaction (n-PCR) test to detect Mycobacterium leprae in samples of nasal mucus from asymptomatic household contacts of patients with leprosy and if can be used to monitor high-risk populations.

Methods

We standardized and optimized a n-PCR technique using a pair of primers LP1 and LP2 external to amplify a fragment of 129 base pairs (bp) region RLEP3 element or sequence X17153 from M. leprae and a second pair of primers LP3 and LP4 that hybridize within the above sequence to amplify a final product of 99 base pairs. We applied the PCR test to 26 healthy household contacts of leprosy patients from area where there was a high prevalence of the disease.

Results

Bacillus was detected in the nasal mucus samples of 5 (19,23%) of the 26 household contacts. The PCR positive household contacts of leprosy cases were from municipalities with very high prevalence levels.

Conclusions

The n-PCR is useful as a tool for detection and early follow-up of possible leprosy cases. It can be used to monitor high-risk populations. Developing and using a PCR test to detect subclinical Mycobacterium leprae infection