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Vol. 11. Núm. 3.
Páginas 85-93 (Julio - Septiembre 2013)
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Vol. 11. Núm. 3.
Páginas 85-93 (Julio - Septiembre 2013)
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¿A qué velocidad «muere» el ácido desoxirribonucleico del espermatozoide tras descongelar muestras seminales procedentes de donantes?
At what speed does sperm deoxyribonucleic acid “die” after donor semen samples are thawed?
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Jaime Gosálveza,
Autor para correspondencia
jaime.gosalvez@uam.es

Autor para correspondencia.
, Carlos García-Ochoab, Miguel Ruíz-Jorroc, Manuel Martínez-Moyad, Pascual Sánchez-Martíne, Pedro Caballerof
a Unidad de Genética, Departamento de Biología, Universidad Autónoma de Madrid, Madrid, España
b Centro de Fecundación In Vitro de Asturias (CEFIVA), Oviedo, Asturias, España
c CREA, Valencia, España
d Centro Gutenberg, Málaga, España
e GINEMED, Sevilla, España
f Clínica Tambre, Madrid, España
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Figuras (2)
Tablas (3)
Tabla 1. Distribución de los valores obtenidos para los niveles basales de daño tras descongelación (t0) y tras lavado de las mismas muestras (T0)
Tabla 2. Distribución de los valores obtenidos para los incrementos del daño (rSDF) entre los periodos experimentales de incubación considerados en el experimento (T0-2, T2-6, T6-24 y T0-24)
Tabla 3. Tabla de doble entrada en la que se identifican los valores de corte para T0, rSDF-T0-2 y TDC y la proporción tanto de donantes como de controles que cumplen las condiciones fijadas en distintos niveles
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Resumen
Objetivo

Analizar los niveles de daño que se registran en el ADN de espermatozoides de donantes y estimar la velocidad a la que este se degrada tras la descongelación.

Material y métodos

Dosis seminales procedentes de donantes (n=50) y un grupo control formado por pacientes normozoospérmicos (n=40). Se estudiaron los valores de fragmentación del ADN espermático (SDF) en su nivel basal, así como los valores de SDF tras incubación de las muestras a 37°C durante 2, 6 y 24h. Se calcularon las velocidades de degradación del ADN por tramos de incubación.

Resultados

El semen criopreservado de donante presenta unos niveles basales de SDF 2 veces inferiores a los observados en los controles, y su ADN es 2,5 veces más longevo que el del grupo control. Niveles basales de SDF sobre un 8% generan una sensibilidad de un 82% y una especificidad de un 65% para discriminar entre los donantes y los controles. Los valores de incremento del daño de 1,8% por hora, analizados durante las 2 primeras horas de incubación, identifican a los donantes con un 77% de sensibilidad y un 65% de especificidad. Ambos valores no muestran ninguna correlación dentro del grupo de los controles, ni entre los donantes.

Conclusiones

El establecimiento de este tipo de valores umbral se podría utilizar para identificar donantes considerados como «superdonantes» en relación con sus bajos niveles de SDF y su alta estabilidad de la cromatina. Los donantes que se seleccionaron en las diferentes clínicas presentan características equiparables para estos parámetros.

Palabras clave:
Espermatozoide
Factor masculino
Criopreservación
Fragmentación del ácido desoxirribonucleico
Donante de semen
Abstract
Objective

The study was made to analyze the baseline levels of damage recorded in sperm DNA fragmentation (SDF) and to estimate sperm DNA longevity as observed in donors after thawing.

Material and methods

Fifty donors and forty individuals attending a clinic and classified as a normo-zoospermic population were compared. The baseline SDF levels and the increasing rate of SDF (r-SDF) obtained after thawing when the sperm was incubated for a period of 24h with different sub-sampling performed after 2, 6 and 24h of incubation were considered as the independent variables and compared.

Results

Cryopreserved donor sperm exhibited baseline SDF values approximately 2 times lower than those observed in the control group. DNA stability was 2.5 times higher than that observed in the control cohort. Baseline values of SDF of approximately 8% generates 65% sensitivity and 82% specificity to discriminate between the donors and controls. Values of increase of damage of 1.8% per hour, analyzed during the first hours of incubation, identify the donor characteristics with 77% sensibility and 65% specificity. Neither value show any correlation within the control and donor cohorts group.

Conclusion

The establishment of these types of threshold values can be used to identify donors considered as “super-donors” in relation to their low levels of SDF and high chromatin stability. The donors selected from the different clinics participating in this study showed similar characteristics for these parameters.

Keywords:
Sperm
Male factor
Cryopreservation
Sperm deoxyribonucleic acid fragmentation
Semen donor

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