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Comparación de los medios hialuronato (SpermSlow) y polivinilpirrolidona en la selección espermática para inyección intracitoplasmática de espermatozoides
Comparison between hyaluronan (SpermSlow) and polyvinylpyrrolidone media in sperm selection for intracytoplasmic sperm injection
Arturo Brassesco-Macazzagaa, Felipe del Río-Buenoa, Olga Cairo-Doncosa, Sergio Rovira-Fontanalsa, Ana Monqauta, Mario Brassesco-Macazzagaa
a Laboratorio de fertilización in Vitro. Centro de Infertilidad y Reproducción Humana (CIRH). Clínica Corachán. Barcelona. España.
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Dicha selecci&#243;n&#44; basada en caracter&#237;sticas morfol&#243;gicas y funcionales del esperamatozoide&#44; permite lograr mejores tasas de fecundaci&#243;n&#44; desarrollo embrionario y embarazos&#44; as&#237; como tambi&#233;n la disminuci&#243;n de las tasas de aborto<span class="elsevierStyleSup">3-8</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Estudios de las caracter&#237;sticas morfol&#243;gicas del espermatozoide han revelado que la presencia de anormalidades acros&#243;micas y subacros&#243;micas se encuentran asociadas a fallos de fecundaci&#243;n in vitro mediante ICSI&#46; M&#225;s recientemente&#44; la observaci&#243;n de la morfolog&#237;a esperm&#225;tica a gran aumento ha revelado que la presencia de vacuolas nucleares estar&#237;a tambi&#233;n relacionada con una funci&#243;n esperm&#225;tica deficiente<span class="elsevierStyleSup">9</span>&#46; En la actualidad&#44; se ha implementado el uso de alta magnificaci&#243;n en la selecci&#243;n esperm&#225;tica <span class="elsevierStyleItalic">&#40;intracytoplasmic morphologically selected sperm injection&#41; </span>previa al ICSI con el objetivo de realizar una selecci&#243;n morfol&#243;gica mas exhaustiva en los pacientes que presentan un claro factor masculino y&#47;o abortos previos<span class="elsevierStyleSup">10-13</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En cuanto a la funcionalidad del espermatozoide&#44; diversos estudios han revelado que el &#225;cido hialur&#243;nico&#44; un mucopolisac&#225;rido no sulfatado presente en la matriz extracelular del ovocito&#44; es uno de los componentes que m&#225;s contribuye a la fertilidad a trav&#233;s de la interacci&#243;n con receptores espec&#237;ficos presentes en la membrana del espermatozoide maduro<span class="elsevierStyleSup">1&#44;14</span>&#46; Por lo tanto&#44; la evaluaci&#243;n de la capacidad del espermatozoide de unirse al &#225;cido hialur&#243;nico constituye una forma de valorar su madurez y funcionalidad<span class="elsevierStyleSup">15-17</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Por tal motivo&#44; en este trabajo se propuso evaluar los beneficios de realizar la selecci&#243;n esperm&#225;tica bas&#225;ndose en las caracter&#237;sticas funcionales del espermatozoide&#44; utilizando como m&#233;todo de selecci&#243;n la capacidad del espermatozoide de reaccionar al hialuronato presente en el medio SpermSlow &#40;Medicult&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">MATERIAL Y M&#201;TODOS </span></p><p class="elsevierStylePara">Se realiz&#243; un estudio prospectivo comparativo entre los medios de Hialuronato &#40;SpermSlow&#44; Medicult&#41; y polivinilpirrolidona &#40;PVP&#44; Medicult&#41; en la selecci&#243;n esperm&#225;tica de pacientes sometidos a ICSI&#46; En el estudio se incluyeron 60 pacientes&#44; de los cuales se recuperaron entre 8 y 16 ovocitos con un porcentaje de m&#225;s de 60&#37; de ovocitos a microinyectar &#40;MII&#41;&#46; Los ovocitos de cada paciente fueron clasificados seg&#250;n su morfolog&#237;a y divididos en 2 grupos de calidad similar&#46; Un grupo se fertiliz&#243; mediante t&#233;cnica de ICSI con espermatozoides seleccionados por medio de hialuronato y el otro por PVP&#46; En todos los pacientes se evaluaron tasas de fertilizaci&#243;n y desarrollo embrionario en d&#237;as &#43;2 y &#43;3 para su posterior transferencia embrionaria&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Criterios de inclusi&#243;n </span></p><p class="elsevierStylePara">- Mujeres menores de 35 a&#241;os en las cuales se recuperaron entre 8 y 16 ovocitos con un porcentaje de m&#225;s del 60 &#37; de ovocitos MII&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Varones con oligoastenozoospermia moderada o severa y menores de 45 a&#241;os&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">T&#233;cnica </span></p><p class="elsevierStylePara">- Placas de PVP&#58; en una placa de Petri de 55 mm se colocaron 2 gotas de 5 &#181;l de PVP a las cuales se agreg&#243; 1 &#181;l de espermatozoides previamente capacitados&#46; Alrededor de &#233;stas se colocaron 8 microgotas de 5 &#181;l de ICSI Holding Medium &#40;Medicult&#41; donde se incorporaron los ovocitos MII&#46; Se cubri&#243; con aceite de parafina y posteriormente se procedi&#243; a la microinyecci&#243;n convencional&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Placas de SpermSlow&#58; en otra placa de Petri se procedi&#243; de la misma forma que la anterior&#44; sustituyendo el PVP por medio SpermSlow&#44; pero en lugar de agregar al medio 1 &#181;l de espermatozoides capacitados&#44; se deposit&#243; la gota capacitada inmediatamente al lado de una de las gotas de SpermSlow&#44; juntando muy cuidadosamente ambas gotas &#40;fig&#46; 1&#41;&#46; Se incub&#243; 15 min al 5&#37; de CO<span class="elsevierStyleInf">2</span> a 37 &#186;C&#46; Posteriormente&#44; se procedi&#243; a seleccionar los espermatozoides m&#243;viles que quedaron adheridos en la interfase de las gotas para realizar&#44; seguidamente&#44; la microinyecci&#243;n &#40;fig&#46; 2&#41;&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><img src="262v07n04-13146997fig1.jpg" alt="Figura 1&#46; Diagrama que muestra c&#243;mo se realiza la selecci&#243;n esperm&#225;tica con SpermSlow&#46; Tomada de How to select the best mature spermatozoa for ICSI&#44; con autorizaci&#243;n de MediCult&#46;"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 1&#46; </span>Diagrama que muestra c&#243;mo se realiza la selecci&#243;n esperm&#225;tica con SpermSlow&#46; Tomada de How to select the best mature spermatozoa for ICSI&#44; con autorizaci&#243;n de MediCult&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="262v07n04-13146997fig2.jpg" alt="Figura 2&#46; Espermatozoides en la interfase hialuronato-semen &#40;aumento&#44; &#215;400&#41;&#46;"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 2&#46; </span>Espermatozoides en la interfase hialuronato-semen &#40;aumento&#44; &#215;400&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">An&#225;lisis estad&#237;stico </span></p><p class="elsevierStylePara">El an&#225;lisis estad&#237;stico se realiz&#243; con el paquete estad&#237;stico SPSS&#46; La comparaci&#243;n de las calidades embrionarias en d&#237;as &#43;2 y &#43;3 se realiz&#243; mediante el test de la &#967;<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">RESULTADOS </span></p><p class="elsevierStylePara">Se fertilizaron 517 ovocitos&#44; 252 por PVP y 265 por SpermSlow&#44; de los cuales en el grupo de PVP fertiliz&#243; de forma normal el 83&#44;3&#37;&#44; anormal el 2&#37; y no fertiliz&#243; el 14&#44;7&#37; de los ovocitos&#44; mientras que en el grupo del SpermSlow fertiliz&#243; de forma normal el 84&#44;9&#37;&#44; anormal el 1&#44;9&#37; y no fertiliz&#243; el 13&#44;2 &#37; &#40;fig&#46; 3&#41;&#46; La calidad embrionaria se analiz&#243; seg&#250;n criterios de ASEBIR del a&#241;o 2008 en A-B-C-D&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><img src="262v07n04-13146997fig3.jpg" alt="Figura 3&#46; Tasa de fecundaci&#243;n de ovocitos microinyectados con espermatozoides seleccionados en SpermSlow o PVP&#46;"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 3&#46; </span>Tasa de fecundaci&#243;n de ovocitos microinyectados con espermatozoides seleccionados en SpermSlow o PVP&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En el d&#237;a &#43; 2 se observ&#243;&#44; con PVP&#44; un 9&#44;3&#37; de embriones tipo A&#44; un 30&#44;2&#37; tipo B&#44; un 43&#44;3&#37; tipo C&#44; un 12&#44;6&#37; tipo D y un 4&#44;6&#37; de embriones no evolutivos &#40;fig&#46; 4&#41;&#46; Con SpermSlow&#44; se observ&#243; un 23&#44;1&#37; tipo A&#44; un 26&#44;1&#37; tipo B&#44; un 36&#44;1&#37; tipo C&#44; un 3&#37; tipo D y un 11&#44;7&#37; de embriones no evolutivos &#40;fig&#46; 4&#41;&#46; En cuanto al d&#237;a &#43;3 se observ&#243; en el grupo de PVP un 15&#44;1&#37; de embriones de calidad embrionaria de tipo A&#44; un 30&#44;2&#37; tipo B&#44; un 33&#44;2&#37; tipo C&#44; un 12&#44;2&#37; tipo D y un 9&#44;3&#37; no evolutivos&#44; y con SpermSlow un 20&#44;8&#37; tipo A&#44; un 26&#44;6&#37; tipo B&#44; un 36&#44;4&#37; tipo C&#44; un 12&#44;3&#37; tipo D y un 3&#44;9&#37; no evolutivos &#40;fig&#46; 5&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="262v07n04-13146997fig4.jpg" alt="Figura 4&#46; Calidades embrionarias a d&#237;a &#43;2 de ovocitos microinyectados con espermatozoides seleccionados en SpermSlow o polivinilpirrolidona &#40;PVP&#41;&#46;"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 4&#46; </span>Calidades embrionarias a d&#237;a &#43;2 de ovocitos microinyectados con espermatozoides seleccionados en SpermSlow o polivinilpirrolidona &#40;PVP&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="262v07n04-13146997fig5.jpg" alt="Figura 5&#46; Calidades embrionarias a d&#237;a &#43;3 de ovocitos microinyectados con espermatozoides seleccionados en SpermSlow o polivinilpirrolidona &#40;PVP&#41;&#46;"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 5&#46; </span>Calidades embrionarias a d&#237;a &#43;3 de ovocitos microinyectados con espermatozoides seleccionados en SpermSlow o polivinilpirrolidona &#40;PVP&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El an&#225;lisis estad&#237;stico mediante el test de la &#967;<span class="elsevierStyleSup">2</span> de las calidades embrionarias en d&#237;a &#43;2 revel&#243; que hay diferencias con un nivel de significaci&#243;n de 0&#44;022 &#40;significativo &#60; 0&#44;05&#41; para las calidades A y D&#44; siendo la calidad A mayor en SpermSlow y la D mayor en PVP&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En cuanto al d&#237;a &#43;3&#44; las diferencias encontradas no resultaron significativas seg&#250;n dicho test &#40;nivel de significaci&#243;n&#58; 0&#44;914&#41;&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">DISCUSI&#211;N </span></p><p class="elsevierStylePara">La selecci&#243;n de espermatozoides para la microinyecci&#243;n contribuye en forma importante al &#233;xito de la ICSI&#46; Previamente&#44; se ha demostrado que los espermatozoides capaces de unirse al hialuronato son m&#225;s maduros&#44; contienen menor da&#241;o en el ADN y menor n&#250;mero de aneuploid&#237;as<span class="elsevierStyleSup">18&#44;19</span>&#46; Esta observaci&#243;n ha llevado a la conclusi&#243;n que el hialuronato constituir&#237;a un buen medio de selecci&#243;n de espermatozoides maduros&#44; y en la actualidad esta hip&#243;tesis se encuentra bajo estudio intensivo en diversos laboratorios<span class="elsevierStyleSup">20-24</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En el presente trabajo se compararon las tasas de fecundaci&#243;n y calidades embrionarias en d&#237;as &#43;2 y &#43;3 obtenidas de ovocitos MII por ICSI con espermatozoides seleccionados en medios de PVP y SpermSlow que contienen hialuronato&#46; No se encontraron diferencias significativas en cuanto a las tasas de fecundaci&#243;n obtenidas en los 2 tratamientos &#40;fig&#46; 3&#41;&#46; Sin embargo&#44; la comparaci&#243;n de las calidades embrionarias seg&#250;n los criterios de ASEBIR&#44; revel&#243; diferencias de embriones tipo A y tipo D&#46; En el medio con hialuronato se obtuvo un mayor porcentaje de embriones tipo A que en PVP&#44; esta diferencia fue m&#225;s importante en el d&#237;a &#43;2 que en el d&#237;a &#43;3&#46; En cuanto a los embriones tipo D&#44; se encontraron menor cantidad de embriones de esta calidad en el medio SpermSlow &#40;figs&#46; 4 y 5&#41;&#46; </p><p class="elsevierStylePara">Si bien las diferencias encontradas resultaron ser estad&#237;sticamente significativas s&#243;lo en d&#237;a &#43;2&#44; no se puede desestimar la tendencia observada tambi&#233;n en d&#237;a &#43;3&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Las diferencias obtenidas en las calidades embrionarias&#44; revelan que el uso de hialuronato en el medio de selecci&#243;n-inyecci&#243;n de espermatozoides favorecer&#237;a la selecci&#243;n de espermatozoides de mejor calidad&#46; Adicionalmente&#44; otra ventaja del hialuronato es que se trata de un compuesto naturalmente presente en el ovocito y&#44; por lo tanto&#44; que no posee efectos da&#241;inos&#59; en cambio&#44; el PVP es un compuesto no metabolizable que podr&#237;a presentar efectos adversos<span class="elsevierStyleSup">15&#44; 25</span>&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">CONCLUSI&#211;N </span></p><p class="elsevierStylePara">El presente trabajo revela que el m&#233;todo de selecci&#243;n esperm&#225;tica basado en la funcionalidad del espermatozoide a trav&#233;s de su capacidad de reacci&#243;n al hialuronato es un m&#233;todo que aporta los mismos resultados que el PVP en cuanto a tasas de fecundaci&#243;n y&#44; adem&#225;s&#44; posee una tendencia a mostrar mejores calidades embrionarias&#46; Adicionalmente&#44; el SpermSlow posee la ventaja de ser un medio similar al natural y&#44; de esta manera&#44; evitar&#237;a el uso de sustancias que pueden tener efectos da&#241;inos&#46; En un futuro&#44; ser&#237;a necesario complementar el presente estudio con resultados de tasas de embarazo y de aborto&#44; en donde podr&#237;an encontrarse mayores evidencias de las ventajas del m&#233;todo funcional de selecci&#243;n esperm&#225;tica&#46; </p><hr></hr><p class="elsevierStylePara">Correspondencia&#58; Dr&#46; A&#46; Brassesco-Macazzaga&#46;<br></br> Centro de Infertilidad y Reproducci&#243;n Humana &#40;CIRH&#41;&#46; Cl&#237;nica Corach&#225;n&#46; Plaza Eguilaz&#44; 14&#46; 08017 Barcelona&#46; Espa&#241;a&#46;<br></br> Correo electr&#243;nico&#58; <a href="mailto&#58;laboratorio&#64;cirh&#46;es" class="elsevierStyleCrossRefs">laboratorio&#64;cirh&#46;es</a></p>"
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Información del artículo
ISSN: 1698031X
Idioma original: Español
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