Staphylococcus aureus es un importante patógeno en los establecimientos de salud; actualmente es una preocupación mundial su frecuente resistencia a múltiples antibióticos. Se investigó la presencia de S.aureus en las superficies de los teléfonos móviles de estudiantes del último año de la carrera de Enfermería en Cuenca, Ecuador. En los aislamientos recuperados de dichas superficies se determinaron los perfiles de sensibilidad a los antibióticos y la presencia de genes de resistencia a dichos agentes; también se determinó la presencia de genes de virulencia. S.aureus se aisló en el 11,84% (9/76) de las muestras. El 44,44% de los aislamientos portaron el gen mecA (MRSA) y ninguno el gen vanA. Los genes de virulencia identificados fueron hla (100% de los aislados), hlb (88,89%), tst y sec (22,22% cada uno), y sea (11,11%). El antibiograma reveló que el 33,33% de las cepas poseían resistencia a cefoxitina y el 44,44%, resistencia inducible a clindamicina (ICRSA). En Cuenca, Ecuador, los teléfonos móviles de los estudiantes de último año de Enfermería constituyen un reservorio de aislamientos de S.aureus resistentes y virulentos, que podrían ser focos infecciosos para la transmisión de este patógeno.
Staphylococcus aureus is an important pathogen in healthcare facilities, with its resistance to a number of antibiotics currently being a global concern. In this report the presence of S.aureus, resistance gene virulence and antibiotic susceptibility profiles were determined in the mobile phones of senior nursing students. S.aureus was isolated in 11.84% (9/76) of the samples. Furthermore, 44.44% of the mobile phones carried the mecA (MRSA) gene, while none carried the vanA gene. Virulence genes identified were 100% hla, 88.89% hlb, 22.22% tst and sec, and 11.11% sea. The antibiogram revealed that 33.33% of the strains were resistant to cefoxitin and 44.44% showed inducible resistance to clindamycin (ICRSA). The mobile phones of senior nursing students represent an important reservoir of drug-resistant and virulent strains of S.aureus, which could act as infectious foci for the transmission of this pathogen.
Las infecciones asociadas a la atención sanitaria (IAAS) son consideradas por la OMS como un factor importante en el incremento del uso de antibióticos y facilitan la aparición de factores de virulencia y resistencia a los antimicrobianos5,7. Staphylococcus aureus se destaca por ser una de las bacterias más frecuentes en las IAAS9. Este microorganismo puede formar biopelículas en las superficies, en dispositivos médicos y en prótesis. En los teléfonos móviles, el calor generado durante su uso facilita el crecimiento bacteriano13. De esta manera, los teléfonos móviles pueden actuar como reservorio de este patógeno durante su uso en la asistencia sanitaria.
S.aureus porta algunos mecanismos de resistencia a los antibióticos, lo que incrementa notablemente su morbimortalidad a nivel mundial. El gen mecA inhabilita la meticilina y los antibióticos betalactámicos; estas cepas son conocidas como S.aureus resistentes a la meticilina (SARM)2,4. El gen vanA es el responsable de los aislamientos de S.aureus resistentes a la vancomicina (SARV); este mecanismo está asociado a cambios en la permeabilidad de la pared bacteriana11.
Actualmente existen reportes de genes de virulencia que contribuyen a la patogenicidad de S.aureus. El gen lukS-F de Panton Valentine codifica la leucocidina, un compuesto que destruye los leucocitos causando necrosis tisular9. Los genes sea, sec y seb codifican enterotoxinas estafilocócicas con capacidad de producir intoxicaciones alimentarias3. El gen tst codifica la toxina1 del síndrome de shock tóxico (TSST-1)15.
El objetivo de esta investigación fue determinar la frecuencia de S.aureus en la superficie de teléfonos móviles de estudiantes de último año de la carrera de Enfermería en Cuenca, Ecuador (ciclo lectivo 2023) y conocer algunas características relevantes de estos aislamientos. Para ello se recurrió a pruebas fenotípicas (fermentación del manitol, coagulasa, DNasa) y genotípicas (detección de genes nucA y femB). Se investigó la resistencia a antimicrobianos mediante antibiograma y por detección de genes de resistencia (mecA, vanA); también se analizó la presencia de genes de virulencia (tst, lukS/F-PV, sea, sec, hla y hlb).
La investigación fue observacional y transversal. En junio de 2023 se tomaron 76 muestras de la superficie de los teléfonos móviles de 76 estudiantes del último año de la carrera de Enfermería: 38 asistían a prácticas comunitarias (C) y 38 a prácticas hospitalarias (H). Todos ellos se encontraban en rotación de su servicio por dos meses y voluntariamente firmaron el consentimiento informado para participar de este estudio.
Dado que el teléfono móvil es un objeto inanimado, no fue necesaria la aprobación por parte del Comité de Ética en Investigación en Seres Humanos (CEISH) del Ecuador para la toma de muestras. El procesamiento de las muestras se realizó en el Laboratorio de Biología Molecular y Genética del Centro de Investigación, Innovación y Transferencia de Tecnología (CIITT) de la Universidad Católica de Cuenca.
Se recolectaron las muestras por la técnica de hisopado de las superficies de teléfonos móviles; estos hisopos se colocaron en el medio de enriquecimiento caldo tripiticasa soya y se incubaron durante 48h a 37°C en aerobiosis. Posteriormente se sembró en agar manitol salado e incubó durante 24-48h a 37°C. El análisis fenotípico se realizó mediante la selección de colonias fermentadoras del manitol, en las que se realizaron las pruebas de coagulasa, catalasa y desoxirribonucleasa3.
El análisis genotípico se realizó mediante la extracción del ADN de las cepas de S.aureus utilizando el método de lisis alcalina2. Mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se identificaron los genes nucA y femB, y posteriormente se investigó la presencia de los genes de resistencia a los antimicrobianos blaZ, mecA y vanA, según Andrade et al.2. Finalmente, se investigó la presencia de los genes de virulencia tst, lukS/F-PV, sea, sec, hla y hlb siguiendo el protocolo descrito por Pacheco et al.9.
La prueba de sensibilidad a los antimicrobianos se realizó de acuerdo a las pautas del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), así como también la interpretación de los resultados para evaluar la sensibilidad a cefoxitina (30μg), clindamicina (2μg) y eritromicina (15μg)6. Las cepas de SARM se identificaron por su resistencia a cefoxitina y las cepas de S.aureus con resistencia inducible a clindamicina (ICRSA) se detectaron mediante el D-test, en el que la presencia de una zona de inhibición aplanada, lo que confiere la forma de letra D alrededor del disco de clindamicina, indica una cepa ICRSA positiva8.
De las 76 muestras de superficies de teléfonos móviles se obtuvieron 9 aislamientos de S.aureus, lo que representa una frecuencia del 11,84%. De los 9 aislamientos, 6 (7,89%) se obtuvieron de los móviles de estudiantes del área hospitalaria y 3 (3,95%) de los móviles de estudiantes del área comunitaria.
El 33,33% (3/9) de los aislados de S.aureus mostraron resistencia a cefoxitina en la prueba de sensibilidad a los antimicrobianos. Asimismo, 4 de estos fueron D-test positivos y 5 fueron D-test negativos (tabla 1). Se identificó que un aislamiento del área comunitaria y otro del área hospitalaria eran S.aureus con resistencia inducible a clindamicina (ICRSA) y también resistentes a meticilina (SARM).
Perfil de resistencia a antimicrobianos en cepas de Staphylococcus aureus aisladas de superficies de teléfonos móviles de estudiantes de último año de Enfermería (Cuenca, Ecuador)
Cepa | Eritromicina | Clindamicina | D-test | Cefoxitina |
---|---|---|---|---|
1C2C15C17C18C25C11H12H38H | 30 mm (S)31 mm (S)17 mm (I)N/AN/AN/A20 mm (I)30 mm (S)N/A | 30 mm (S)31 mm (S)30 mm (S)N/AN/AN/A31 mm (S)30 mm (S)N/A | (−)(−)(−)(+)(+)(+)(−)(−)(+) | 30 mm (S)30 mm (S)a28 mm (S)28 mm (S)28 mm (S)20 mm (R)b20 mm (R)28 mm (S)20 mm (R)c |
Las letras C y H identifican las cepas obtenidas de los teléfonos móviles de estudiantes que asistían a prácticas comunitarias u hospitalarias, respectivamente.
S: sensible; R: resistente; I: intermedia; N/A: no aplica.
Mediante los métodos moleculares se encontró que 4 aislamientos (44,44%) portaban el gen mecA y ninguno el gen vanA (tabla 2). Si bien los métodos genotípicos hallaron al aislado 2C como portador del gen mecA, este se mostró sensible a la cefoxitina en el antibiograma (tabla 1); probablemente se trate de un gen silenciado en este caso. En todos los aislamientos de S.aureus se identificaron dos o más genes de virulencia, incluidos tst, sea, sec, hla y hlb (tabla 2). El gen lukS/F-PV no se detectó en ningún aislamiento.
Genes de resistencia y genes de virulencia en cepas de Staphylococcus aureus aisladas de superficies de teléfonos móviles de estudiantes de Enfermería (Cuenca, Ecuador)
Genes de resistencia | Genes de virulencia | ||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Cepa | blaZ | mecA | vanA | tst | lukS/F-PV | sea | sec | hla | hlb |
1C | + | − | − | + | − | − | − | + | + |
2C | + | + | − | − | − | − | − | + | + |
15C | + | − | − | ||||||
17C | + | − | − | − | − | − | − | + | + |
18C | + | − | − | − | − | − | − | + | + |
25C | + | + | − | − | − | − | + | + | + |
11H | + | + | − | − | − | − | + | + | + |
12H | − | − | − | − | − | + | − | + | − |
38H | + | + | − | − | − | − | − | + | + |
n | 8/9 | 4/9 | 0/9 | 2/9 | 0/9 | 1/9 | 2/9 | 9/9 | 8/9 |
% | 88,89 | 44,44 | 0 | 22,22 | 0 | 11,11 | 22,22 | 100 | 88,88 |
Las letras C y H identifican las cepas obtenidas de los teléfonos móviles de estudiantes que asistían a prácticas comunitarias u hospitalarias, respectivamente.
Los datos presentados son de gran importancia, pues muestran que el 11,84% de los teléfonos móviles de este conjunto de estudiantes de Enfermería portaban S.aureus, un patógeno altamente virulento, resistente a los antibióticos y que puede ser transmitido a los pacientes mediante contaminación cruzada.
Resultados similares fueron informados por Pacheco et al.9 en una investigación que analizó teléfonos móviles de estudiantes de Odontología de la misma ciudad ecuatoriana. Ese reporte documentó que el 17,39% de los dispositivos portaban S.aureus9. Un estudio realizado en Ghana evidenció menores frecuencias de colonización por esta bacteria en teléfonos móviles de enfermeras y estudiantes universitarios del área de la salud12. Esta discrepancia podría sugerir una deficiente desinfección de los teléfonos móviles en nuestro medio.
Es importante recalcar que el 44,44% de los aislamientos de S.aureus recuperados en este estudio portaban el gen mecA (4/9); estos pueden diseminarse en diferentes áreas y limitar los tratamientos. El estudio realizado en Ghana antes citado mostró resistencia a cefoxitina en el 28% de las cepas recuperadas12. Esta disparidad de resultados podría deberse a que la investigación en Ghana abarcó los teléfonos móviles de los trabajadores de la salud en general.
En otro orden, en un aislamiento se identificó el gen mecA mediante pruebas moleculares, pero en el antibiograma ese aislamiento se mostró sensible a cefoxitina. Este es un aspecto relevante recientemente descrito por Rasheed et al.10, quienes señalan que algunos aislamientos de S.aureus presentan este comportamiento de genes silenciados, y que en algún momento los productos de dichos genes reaparecen creando fallas terapéuticas, lo que enfatiza la importancia del diagnóstico molecular, que adquiere carácter obligatorio en casos de infecciones por bacterias resistentes en pacientes inmunocomprometidos.
En este informe se describe que dos aislamientos fueron SARM y a la vez ICRSA (uno del área comunitaria y otro del área hospitalaria); de esta manera, se limita el uso de betalactámicos, macrólidos y lincosamidas. En el plano microbiológico, realizar el D-test evita futuros fracasos del tratamiento farmacológico1.
Los aislamientos de S.aureus portan en su genoma, además, genes de virulencia que pueden agravar el cuadro clínico del paciente. En este trabajo se evidenció la presencia de los genes tst (22,22%), sea (11,11%), sec (22,22%), hla (100%) y hlb (88,88%). En un estudio realizado en Australia se aisló S.aureus como parte del grupo ESKAPE (acrónimo de seis patógenos altamente virulentos y resistentes a los antibióticos) y se identificaron 15 genes de virulencia en hisopados de teléfonos móviles de trabajadores de la salud14. Coincidimos con los autores de dicho reporte, quienes señalan que, en virtud del frecuente hallazgo de genes de resistencia y virulencia, los teléfonos móviles deben considerarse un mecanismo de transmisión de patógenos tanto a nivel hospitalario como comunitario.
Este informe demuestra que los teléfonos móviles de los estudiantes de último año de la carrera de Enfermería en Cuenca, Ecuador, constituyen un importante reservorio de aislamientos de S.aureus resistentes y virulentos, que podrían ser focos infecciosos para la transmisión de este patógeno entre los estudiantes y los pacientes. Frente a este tipo de aislamientos, las opciones terapéuticas son limitadas, complicando en gran medida el cuadro clínico de los pacientes, que se infectan mediante contaminación cruzada en aquellas áreas comunitarias y hospitalarias en las que los estudiantes de Enfermería realizan sus prácticas. Considerando impensable prescindir hoy en día del uso de los teléfonos móviles en la asistencia sanitaria, recomendamos limpiar y desinfectar las superficies de dichos dispositivos para evitar la propagación de este patógeno e instaurar protocolos de desinfección.
FinanciaciónEste artículo ha sido desarrollado por parte del Grupo de Investigación en Genética y Biología Molecular de Microorganismos de la Universidad Católica de Cuenca (GI-GyBM2). Los autores indican que para el desarrollo de esta investigación los fondos fueron entregados por la Universidad Católica de Cuenca como parte del proyecto de investigación denominado «Detección de genes de resistencia y virulencia de Staphylococcus aureus aislados en pantallas de celulares del personal de salud de un hospital de Cuenca-Ecuador, 2021».
Conflicto de interesesLos autores de este artículo declaran que no existe conflicto de intereses.
A la Universidad Católica de Cuenca por facilitarnos los equipos, suministros y el Laboratorio de Biología Molecular y Genética del CIITT, necesarios para desarrollar esta investigación. A la vez también agradecer a los estudiantes de último año de Enfermería (2023) de la Universidad de Cuenca por permitirnos recolectar las muestras de las superficies de los teléfonos móviles.