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Vol. 32. Núm. 3.
Páginas 225 (Marzo 2009)
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Vol. 32. Núm. 3.
Páginas 225 (Marzo 2009)
DOI: 10.1016/j.gastrohep.2009.01.101
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RESISTENCIA A LA APOPTOSIS EN LINFOCITOS T EN SANGRE PERIFERICA EN PACIENTES CON E. DE CROHN (EC)
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B. Beltrán, I. Moret, M. Iborra, G. Bastida, F. Rausell, J. Ponce, P. Nos
M. Digestiva, H. La Fe, Ciberehd
Información del artículo

En la EC existe una resistencia a la apoptosis en lamina propia intestinal, no existen estudios homogeneos en celulas mononucleres en sangre periférica.

Objetivo

Estudiar la susceptibilidad a la apoptosis de los linfocitos no activados de sangre periférica de pacientes EC, después de activar la células in vitro y añadirles un estímulo apoptótico externo (anticuerpo (Ac) agonista Fas).

Métodos

Se obtuvo sangre heparinizada de sujetos control (n=11) y de EC al debut y sin medicación (n=8). Los pacientes fueron diagnosticados siguiendo los criterios Leonard-Jones y la actividad según el Harvey-Bradshaw. Los linfocitos fueron aislados mediante centrifugación en gradiente con Histopaque®, seguido de una purificación en negativo de los linfocitos T no activados (Depletion Dynabeads®). Las células así aisladas, fueron cultivadas durante 5 días en presencia (o ausencia) de Ac CD3 unido a la placa y Ac CD28 diluído en medio X Vivo-15 (Lonza). Transcurrido este tiempo necesario para activar las células, se añadió Ac Fas (1μg/mL) y transcurridas las incubaciones de 5 y 24h, se detectó la apoptosis mediante citometría de flujo (Annexin-V).

Resultados

La activación de los linfocitos T mediada por la exposición a los Ac CD3/CD28 resultó en un incremento de la apoptosis, tanto en los controles (52,37±5,2) como en la EC (36,54±3,9) p=0,052. Al añadir el Ac Fas, se incrementó el porcentaje de células apoptóticas (controles 66,09±3,2 vs EC 53,37±6,2); pero fue necesaria una exposición de 24h para que este efecto fuera significativo: controles 69,05±3,7 vs EC 53,35±5,6 (p=0,033).

Conclusiones

La resistencia a la apoptosis, puede ser una característica que presenten los linfocitos T de sangre periférica antes de alcanzar la mucosa intestinal. Esta alteración intrínseca en la capacidad apoptótica ayuda a clarificar la relación entre, respuesta inmune innata y adquirida en la EC y la fisiopatología de la enfermedad.

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