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Diversidad de subtipos de Legionella pneumophila en torres de refrigeración: estudios de cinética de crecimiento y virulencia
Diversity of Legionella pneumophila in cooling towers: coculture kinetics and virulence studies
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Sonia Ragulla,c, Marian García-Núñeza,c, María Luisa Pedro-Boteta,c, Celestino Rey-Jolyb, Miquel Sabriaa,c,??
Autor para correspondencia
msabria.germanstrias@gencat.cat

Autor para correspondencia.
a Unidad de Enfermedades Infecciosas, Fundació Institut d’Investigació Germans Trias i Pujol, Universidad Autónoma de Barcelona-Esfera UAB, Badalona, Barcelona, España
b Medicina Interna, Hospital Germans Trias i Pujol, Universidad Autónoma de Barcelona-Esfera UAB, Badalona, Barcelona, España
c CIBER de Enfermedades Respiratorias, Instituto de Salud Carlos III, Madrid, España
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Figuras (2)
Tablas (3)
Tabla 1. Subtipo MAb 3/1 determinado con Dresden Panel plus contra L. pneumophila sg.1 y la tasa de crecimiento intracelular a las 24 y a las 72 horas.
Tabla 2. Proporción de cepas ambientales con subtipo de ADN cromosómico idéntico a los asilados clínicos (A) en la coinfección de células U937.
Tabla 3. Proporción de cepas con subtipo de ADN cromosómico idéntico a la cepa clínica (A) en los tres experimentos de cocultivo en medio BCYE.
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Resumen
Introducción

Legionella pneumophila (L. pneumophila) fue aislada en tres torres de refrigeración implicadas en tres brotes de legionelosis comunitaria. En cada una de ellas se encontraron cepas con dos subtipos diferentes de ADN cromosómico. Sin embargo, sólo uno de ellos era idéntico al de las cepas clínicas. Para intentar entender porque solo una de las cepas ambientales produjo los casos clínicos investigamos la virulencia intrínseca de estas cepas.

Métodos

Se seleccionaron 6 cepas de L. pneumophila sg.1: dos cepas (A1 y B1) procedentes de la torre de refrigeración 1, dos cepas (A2 y B2) de la torre 2 y dos cepas (A3 y B3) de la torre 3. Las cepas A presentaban un perfil de ADN cromosómico idéntico a la cepa clínica aislada en los individuos afectados en cada uno de los brotes de legionelosis. La cepa B presentaba un perfil cromosómico diferente. Se realizaron ensayos de replicación en macrófagos, se determinó la presencia del epítopo reconocido por MAb 3/1 y se estudió la cinética de crecimiento en medio BCYE. Las cepas se tipificaron mediante electroforesis en campo pulsante.

Resultados

Las cepas A no presentaron mayor grado de virulencia, sin embargo, fueron capaces de crecer y sobrevivir mejor que las cepas B en medio BCYE.

Conclusiones

Estos resultados sugieren que las cepas mejor adaptadas al medio conseguirán desplazar a las demás y serán capaces de propagarse e infectar a los humanos. La adaptación a las condiciones ambientales podría desempeñar un papel importante en la patogenia de cada cepa.

Palabras clave:
Legionella pneumophila
Infecciones comunitarias
Epidemiología molecular
Virulencia
Abstract
Background

Legionella pneumophila (L. pneumophila) was isolated from three cooling towers involved in three community outbreaks of Legionnaires?? disease. Each cooling tower had two different chromosomal DNA subtypes. However, only one matched identically to the clinical strains. To try to understand why only one of the environmental strains caused clinical cases we investigated the intrinsic virulence of these strains.

Methods

We selected six strains of L. pneumophila sg.1: two strains (A1 and B1) from cooling tower 1, two strains (A2 and B2) from tower 2 and two strains (A3 and B3) from tower 3. One of the two subtypes (A) exhibited the same chromosomal DNA subtype as the strains isolated from the patients in each outbreak and the other exhibited a different subtype. The replication within macrophages, the presence of lipopolysaccharide epitope recognized by MAb 3/1 and the growth kinetics in BCYE broth were investigated. Isolates were typed by pulsed field electrophoresis.

Results

The A strains did not have a higher virulence level, but were able to grow and survive better than strains B in BCYE broth.

Conclusions

These results suggest that the strains better adapted to the environment will manage to displace the others and will be able to spread and infect humans. The adaptation to the environmental conditions could play an important role in the pathogenesis of the strains.

Keywords:
Legionella pneumophila
Community infections
Molecular epidemiology
Virulence traits

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