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Multicenter study of clinical non-β-lactam-antibiotic susceptible MRSA strains: Genetic lineages and Panton-Valentine leukocidin (PVL) production
Estudio multicéntrico de cepas clínicas de SARM sensibles a antibióticos no-β-lactámicos: líneas genéticas y producción de la leucocidina de Panton-Valentine
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Sara Ceballosa, Carmen Aspirozb, Laura Ruiz-Ripaa, José Manuel Azcona-Gutierrezc, Lorena López-Cererod, Ana Isabel López-Callejae, Ledicia Álvarezf, María Gomárizg, Marina Fernándezh, Carmen Torresa,
Autor para correspondencia
carmen.torres@unirioja.es

Corresponding author.
, Study Group of Clinical LA-MRSA
a Area Bioquímica y Biología Molecular, Universidad de La Rioja, Logroño, Spain
b Servicio de Microbiología, Hospital Royo Villanova, Zaragoza, Spain
c Departamento de Diagnóstico Biomédico, Laboratorio de Microbiología, Hospital San Pedro, Logroño, Spain
d Servicio de Microbiología, Hospital Virgen Macarena, Sevilla, Spain
e Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Miguel Servet, Zaragoza/IIS Aragón, Zaragoza, Spain
f Servicio de Microbiología, Hospital Universitario de Burgos, Burgos, Spain
g Servicio de Microbiología, Hospital Universitario de Donostia, San Sebastián, Spain
h Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Marqués de Valdecilla, Santander, Spain
Study Group of Clinical LA-MRSA
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Recibido 29 octubre 2018. Aceptado 09 enero 2019
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Table 1. Distribution of isolates (number of S. aureus, MRSA and NBLS-MRSA), prevalence and NBLS-MRSA spa-types per hospital.
Table 2. Molecular typing, samples origin and genotypic characterization of the 45 NBLS-MRSA isolates.
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Abstract
Introduction

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is considered a major cause of healthcare-associated (HA) and community-acquired (CA) infections. Considering non-β-lactam susceptibility as a potential marker for mecC-MRSA and CA-MRSA, the aim of this study was to determine the frequency and the associated genetic lineages of non-beta-lactam-antibiotic susceptible MRSA (NBLS-MRSA) strains in a multicenter study in Spain.

Methods

A collection of 45 NBLS-MRSA strains recovered in the period from January to June 2016 from 12 Spanish hospitals was analyzed. Molecular typing through spa-type characterization, agr group and multi-locus-sequence typing was performed. Methicillin-resistant genes (mecA and mecC) as well as immune evasion cluster (scn-chp-sak-sea-sep, considering scn gene as the marker of IEC system) and Panton-Valentine leukocidin (PVL) genes were determined with PCR/sequencing.

Results

The NBLS-MRSA phenotype was uncommon in the 12 hospitals analyzed (NBLS-MRSA/MRSA frequency: 0.3%-7.7%). All strains contained the mecA gene (and none contained mecC). Twenty-two different spa-types were detected among NBLS-MRSA strains, with spa-t008/agr-I the most prevalent (27%). The main clonal complexes were (CC/%): CC8/42.2%, CC5/33.3% and CC30/4.4%, with ST8 and ST5 as the main sequence types. The PVL toxin was present in 38% of strains (with spa-types t008, t024, t019, t044, t068, t318 and t3060). The IEC genes were detected in 78% of strains: IEC type-B (n=17), type-F (n=16), type-A (n=1) and type-E (n=1); 10 MRSA isolates were scn-negative.

Conclusion

The NBLS-MRSA phenotype is uncommon in the analyzed hospitals; although no mecC-positive strains were detected, it could be a good marker for MRSA PVL-positive isolates (38%), frequently associated with CA-MRSA infections.

Keywords:
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus
Susceptible to non-beta-lactam antibiotics
mecA
mecC
PVL
CC8
Resumen
Introducción

Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) es una de las principales causas de infecciones tanto relacionadas con la asistencia sanitaria como asociadas a la comunidad (AC). Considerando la sensibilidad a antibióticos no-β-lactámicos como marcador potencial de SARM-mecC y SARM-AC, el objetivo de este estudio fue determinar la frecuencia y líneas genéticas de cepas SARM sensibles a antibióticos no-β-lactámicos (SARM-SNBL) en un estudio multicéntrico en España.

Métodos

Se analizaron 45 cepas SARM-SNBL procedentes de 12 hospitales obtenidas durante enero-junio de 2016. El tipado molecular se realizó mediante caracterización del spa-tipo, grupo agr y multi-locus-sequence typing. Mediante PCR/secuenciación se determinaron los genes: de resistencia a meticilina (mecA y mecC), del sistema de evasión inmune humano (scn-chp-sak-sea-sep, usando scn como marcador del sistema IEC) y de la leucocidina de Panton-Valentine (LPV).

Resultados

El fenotipo SARM-SNBL fue infrecuente en los 12 hospitales analizados (frecuencia SARM-SNBL/SARM: 0,3-7,7%). Todas las cepas fueron mecA-positivas (ninguna mecC). Se detectaron 22 spa-tipos diferentes, siendo el spa-t008/agr-I el prevalente (27%). Los principales complejos clonales fueron (CC/%): CC8/42,2%, CC5/33,3% y CC30/4,4%, destacando las secuencias tipo ST8 y ST5 como mayoritarias. El 38% de las cepas fue LPV-positiva (spa-tipos t008, t024, t019, t044, t068, t318 y t3060). El 78% de las cepas fue IEC-positivo: tipo-B (n=17), tipo-F (n=16), tipo-A (n=1) y tipo-E (n=1); 10 aislados fueron scn-negativos.

Conclusión

El fenotipo SARM-SNBL es poco frecuente en los hospitales analizados; aunque no se detectaron cepas mecC-positivas, este fenotipo puede ser un buen marcador de aislados SARM LPV-positivos, frecuentemente asociados a infecciones por SARM-AC.

Palabras clave:
Staphylococcus aureus resistente a meticilina
Sensible no-betalactámico
mecA
mecC
Leucocidina de Panton-Valentine
CC8

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